[发明专利]一种提高棉花转基因效率的方法在审
| 申请号： | 201510519959.0 | 申请日： | 2015-08-15 |
| 公开（公告）号： | CN105002209A | 公开（公告）日： | 2015-10-28 |
| 发明（设计）人： | 刘红玲;祝建波;朱华国;孙燕飞;邱红林;王彦芹 | 申请（专利权）人： | 石河子大学 |
| 主分类号： | C12N15/82 | 分类号： | C12N15/82 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 832000 新疆维吾尔自治区*** | 国省代码： | 新疆;65 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种提高棉花转基因效率的方法，用限制性内切酶酶切DNA与质粒DNA保护剂混合后，利用脂质体包装携带Ti质粒上的毒蛋白基因通过花粉管通道法将目的基因导入棉花中。本发明可以有效提高转基因效率。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 提高 棉花 转基因 效率 方法 | ||
【主权项】：
一种提高棉花转基因效率的方法，其特征在于，包括如下步骤；S1、冰上操作，将表达纯化后的农杆菌毒蛋白VirD1、VirD2、VirE2浓度分别调整至100μg/μl；S2、用限制性内切酶酶切DNA后连接到pBin438质粒上构建外源质粒DNA；S3、将所得外源质粒DNA重悬于质粒DNA保护剂中，得外源质粒DNA的浓度为1μg/μL的混合液；S4、取步骤S1所得溶液中的一种或几种共2μl，依次加入含8μl外源质粒DNA的步骤S3所得的混合液，6μl脂质体混合后，加入30μl的缓冲液中，4℃放置2小时后，取出，通过花粉管通道法将目的基因导入棉花中。
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