[发明专利]一种刚果红染色法

摘要

本发明公开了一种刚果红染色法，其步骤是：在羧甲基纤维素钠琼脂平板培养基上涂布接种细菌，将平板培养基放入恒温培养箱培养，长出形态清晰的单个菌落；根据菌落形态标记出目标菌落；在长出菌落的平板培养基上，用浓度为2～5mg/mL的刚果红溶液浸泡平板培养基，浸泡0.5～1分钟后去掉刚果红溶液；加入浓度为l mol/L的氯化钠溶液冲洗平板培养基1～3次，再用浓度为l mol/L的氯化钠溶液浸泡平板培养基3～5分钟，然后倒掉氯化钠溶液，产生纤维素酶的菌落周围将会出现淡黄色的透明圈。本发明染色和浸泡时间的缩短减少了菌落的弥散，降低了交叉污染的可能性，节省了时间。

主权项

1.一种刚果红染色法，其步骤是：(1)涂布接种细菌：在羧甲基纤维素钠琼脂平板培养基上涂布接种细菌，将涂布有细菌的平板培养基放入恒温培养箱，在温度28℃的条件下培养，直至长出形态清晰的单个菌落，所述羧甲基纤维素钠琼脂平板培养基的配置方法是：称取羧甲基纤维素钠2克，酵母浸粉5克，琼脂18克；用陈海水1000毫升将称取的物质溶解得到羧甲基纤维素钠琼脂溶液；将羧甲基纤维素钠琼脂溶液用高压灭菌锅在高温高压环境下灭菌；将灭菌后的羧甲基纤维素钠琼脂溶液倾倒平板培养基；(2)菌落标记：选择菌落密度合适的平板培养基，根据菌落形态标记出目标菌落；(3)染色：在长出菌落的平板培养基上，用浓度为2～5mg/mL的刚果红溶液浸泡平板培养基，浸泡0.5～1分钟后去掉刚果红溶液，所述浓度为2～5mg/mL的刚果红溶液为质量体积比，即在100毫升的水里面加0.2～0.5克的刚果红；(4)冲洗和浸泡：加入浓度为1mol/L的氯化钠溶液冲洗平板培养基1～3次，再用浓度为1mol/L的氯化钠溶液浸泡平板培养基3～5分钟，然后倒掉氯化钠溶液，此时，产生纤维素酶的菌落周围将会出现淡黄色的透明圈。