[发明专利]一种抗凝血黑莓籽多糖及其提取分离方法、应用

摘要

本发明属于植物提取技术领域，具体涉及一种抗凝血黑莓籽多糖及其提取分离方法、应用。该提取分离方法将黑莓籽粉碎后，用水提醇沉的方法得到粗多糖，再分别通过DEAE‑52纤维素柱色谱和SephadexG‑100凝胶柱色谱得到三个多糖。本发明采用特殊的提取分离方法从黑莓籽中分离得到三个多糖，并对这三个多糖的体外凝血效果进行考察，结果表明，这三个多糖均有良好的抗凝血效果。

主权项

抗凝血黑莓籽多糖的提取分离方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）将黑莓籽粉碎，室温下用石油醚脱脂，挥干石油醚后，药渣用乙醇提取，过滤，阴干残渣，然后向残渣中加入蒸馏水提取，趁热抽滤，合并滤液后减压浓缩，再向浓缩液中加入乙醇，静置离心，得到的沉淀加蒸馏水溶解透析以除去小分子杂质，减压浓缩，冷冻干燥即得黑莓籽粗多糖；（2）取黑莓籽粗多糖溶于蒸馏水中，过滤，弃去杂质后加入到DEAE‑52纤维素色谱柱，依次用蒸馏水、0.1mol/L氯化钠溶液和0.2 mol/L氯化钠溶液进行洗脱，洗脱液采用苯酚‑硫酸法进行检测，测490 nm处的吸光度，以洗脱管数为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制洗脱曲线，合并同一洗脱峰的多糖样品，透析、浓缩后冷冻干燥；其中，蒸馏水洗脱峰为组分1，0.1 mol/L氯化钠溶液的洗脱峰为组分2，0.2 mol/L氯化钠溶液的洗脱峰为组分3；（3）组分1溶于蒸馏水中、过滤弃去杂质，加入到Sephadex G‑100凝胶色谱柱，用蒸馏水进行洗脱，采用苯酚‑硫酸法进行检测，在波长490 nm处测其吸光度，以洗脱管数为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制洗脱曲线，得到两组洗脱峰，浓缩第2组洗脱峰，冷冻干燥得到的多糖命名为BSP‑2；（4）组分2和3均采用步骤（3）组分1的方法进行洗脱，得单一洗脱峰，分别命名为BSP‑3和BSP‑4；BSP‑2、BSP‑3和BSP‑4即为抗凝血黑莓籽多糖。