[发明专利]一种快速提取全血基因组DNA的装置及其方法有效

专利信息
申请号: 201510532629.5 申请日: 2015-08-26
公开(公告)号: CN105176972B 公开(公告)日: 2019-05-21
发明(设计)人: 关明;汪骅 申请(专利权)人: 复旦大学附属华山医院
主分类号: C12N15/10 分类号: C12N15/10;C12M1/00
代理公司: 上海申新律师事务所 31272 代理人: 竺路玲
地址: 200431 上*** 国省代码: 上海;31
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摘要: 发明提供了一种快速提取全血基因组DNA的装置,包括有一体化成型的毛细采集管、全血细胞裂解区、流体控制管,还包括有与所述流体控制管相配合的抽吸装置,所述全血细胞裂解区由聚丙烯丝束填充;本发明首次使用聚丙烯丝束/毛细管实现了末梢血基因组DNA提取,本发明的装置和方法操作简单、效率高,无需特殊仪器,实现了基于微流控芯片的全血基因组DNA“样品进‑结果出”的目的,所提取的基因组DNA适合于分子诊断的测序、杂交、等温扩增等一系列实验。
搜索关键词: 一种 快速 提取 基因组 dna 装置 及其 方法
【主权项】:
1.一种快速提取全血基因组DNA的方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤一,利用毛细采集管(1)采集末梢血5‑20μl,使用抽吸装置(4)将采集的末梢血吸入全血细胞裂解区(2)中;步骤二,利用抽吸装置(4)将10‑40μl裂解液吸入全血细胞裂解区(2)中进行细胞裂解,并使用采集管封管器(5)、控制管封管器(6)分别密封毛细采集管(1)和流体控制管(3),裂解温度为56℃,持续10分钟;步骤三,去除采集管封管器(5)及控制管封管器(6),利用抽吸装置(4)将15‑60μl无水乙醇吸入全血细胞裂解区(2)中;步骤四,利用抽吸装置(4)将100‑130μl的75%乙醇吸入全血细胞裂解区(2)进行漂洗,漂洗过程反复进行2‑5次;步骤五,利用抽吸装置(4)将25‑100μl去离子水吸入全血细胞裂解区(2)将DNA洗脱,获得全血基因组DNA;其中,所述步骤二中裂解液pH为8,其中的组分和浓度为:10mM Tris‑Cl,15mM NaCl,10mM EDTA,0.4%SDS,200μg/ml蛋白酶K;其中,上述方法基于下述装置实现,该装置包括有一体化成型的毛细采集管(1)、全血细胞裂解区(2)、流体控制管(3),还包括有与所述流体控制管(3)相配合的抽吸装置(4),所述全血细胞裂解区(2)由聚丙烯丝束填充,还包括能够密封毛细采集管(1)的采集管封管器(5),以及能够密封流体控制管(3)的控制管封管器(6);所述全血细胞裂解区(2)管壁厚度为0.1‑0.4mm,容积为100‑130μl;其中,所述全血细胞裂解区(2)为直径6mm的圆球形;其中,所述毛细采集管(1)长2‑6cm,管壁厚度为0.1‑0.4mm,内径为0.5‑0.7mm;其中,所述流体控制管(3)长1‑3cm,管壁厚度为0.1‑0.4mm,内径为1‑1.2mm;其中,所述毛细采集管(1)、全血细胞裂解区(2)以及流体控制管(3)均为玻璃材料制作。
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