[发明专利]一种测定龙葵中总生物碱含量的方法

摘要

本发明公开了一种采用酸性染料比色法以紫外分光光度计测定龙葵中总生物碱含量的方法。其特点在于：采用龙葵碱为对照品，用氯仿制成对照品溶液；采用酸-醇混合溶剂超声提取龙葵中总生物碱，制成供试品溶液；酸性染料比色法的显色条件为pH=3.6，缓冲液3.5mL，溴甲酚绿液2.0mL，以氯仿10mL分3次萃取，静置30min。检测波长为243nm，根据吸光度进行含量测定。龙葵总生物碱在5-30μg/mL范围内呈线性关系，回收率平均值99.7%，RSD=1.4%（n=6）。本发明的测定方法操作简便，成本低廉、回收率高、重现性好，可用于测定龙葵中总生物碱的含量。

主权项

一种测定龙葵中总生物碱含量的方法，其特征在于包括以下步骤：（1）对照品溶液的制备：精密称取干燥至恒重的龙葵碱对照品5.00 mg，用氯仿溶解，超声20 min，转移至50 mL容量瓶，加氯仿稀释至刻度，摇匀即得0.1 mg/mL的对照品储备液；（2）标准曲线的制作：精密吸取对照品储备液于5ml量瓶中用氯仿稀释配成梯度的标准溶液，精密吸取2ml标准溶液置于分液漏斗中，加入酸性缓冲溶液及溴甲酚绿染料溶液进行显色，再加入氯仿萃取，分取氯仿层脱水处理，取上清液按照紫外分光光度法，于243 nm处测定吸光度；以氯仿以相同试剂及步骤处理做空白对照；以龙葵碱含量为横坐标，以其吸光度值为纵坐标，得龙葵总生物碱含量测定标准曲线；（3）供试品溶液的制备：精密称取已过14目筛的龙葵药材粉末2.0g，置于锥形瓶，加入体积比为1∶4的2 mol/L盐酸和90%乙醇混合溶剂30 mL，于40℃下超声提取35min，提取液减压回收乙醇至无醇味的浸膏，浸膏用10%盐酸溶解，超声20 min助溶，抽滤去除沉淀，用10%盐酸定容至10 mL，用10 %NaOH调节pH至10‑11，加氯仿萃取3次，收集氯仿液，定容至25ml，即得供试品溶液；（4）样品溶液的含量测定：精密吸取供试品溶液2.0mL，按照步骤（2）中所述，加入酸性缓冲溶液及溴甲酚绿染料溶液进行显色，再加入氯仿萃取，分取氯仿层脱水处理，取上清液按照紫外分光光度法，于243 nm处测定吸光度，代入标准曲线，计算得到龙葵总生物碱的含量。