[发明专利]一种水稻温敏不育基因tms5的功能标记及其应用

摘要

本发明提供了一种用于水稻温敏不育基因tms5的功能标记、利用该功能标记检验样品是否为含有tms5基因的方法、利用该功能标记基因判断两系温敏水稻的种子纯度的方法以及其在培育不育系中的应用。本发明根据水稻tms5基因突变位点序列，在PCR引物中引入错配碱基，使含有tms5基因(突变型)的水稻PCR扩增产物出现一个限制性内切酶Rsa I的酶切位点，而不含有tms5基因(野生型)的水稻PCR产物则没有这一酶切位点。通过Rsa I酶切PCR产物，可将含有tms5基因的水稻PCR扩增产物酶切成两个片段，而不含的却无法被切开，从而进行区分。本发明采用直接酶切tms5扩增产物的设计，与前人相比，一方面简化了检测流程，另一方面也避免了假阳性结果的出现。

主权项

一种用于水稻温敏不育基因tms5检测的引物组，其特征在于，所述引物组由第一引物和第二引物构成，所述第一引物中包含错配碱基，所述第一引物的序列如SEQ ID No.1中所示，所述第一引物的最后一个碱基为错配碱基；所述第二引物的序列如SEQ ID No.2、SEQ ID No.3或SEQ ID No.4中所示，所述引物组能够通过单次酶切过程来验证水稻温敏不育基因tms5。