[发明专利]一种从茶花粉中快速分离酪氨酸酶抑制剂的方法有效

专利信息
申请号: 201510551691.9 申请日: 2015-09-02
公开(公告)号: CN105168042B 公开(公告)日: 2017-10-27
发明(设计)人: 杨远帆;赖小燕;倪辉;杜希萍;伍菱;陈艳红;姜泽东;李利君;傅佳愈;蔡慧农 申请(专利权)人: 集美大学
主分类号: A61K8/9789 分类号: A61K8/9789;A61Q19/02
代理公司: 暂无信息 代理人: 暂无信息
地址: 361000 福*** 国省代码: 福建;35
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摘要: 发明公开了一种从茶花粉中快速分离酪氨酸酶抑制剂的方法,主要包括如下步骤以茶花粉为原料,经过提取、萃取、高速逆流色谱纯化和干燥得到茶花粉酪氨酸酶抑制剂,它对酪氨酸酶具有高效抑制作用,IC50值为41.57μg/mL。本发明方法快速简单,原料天然、无毒,所得产物的抑制活性强,因此利用HSCCC从茶花粉开发天然酪氨酸酶抑制剂,用于美白化妆品、预防和治疗由于人体黑色素过多导致的沉着性疾病,具有很好的商业前景。
搜索关键词: 一种 茶花 快速 分离 酪氨酸 抑制剂 方法
【主权项】:
一种从茶花粉中快速分离酪氨酸酶抑制剂的方法,其特征在于:包括以下步骤:步骤一、提取:将茶花粉干燥、粉碎,按料液比(W/V)1:10加入80%的乙醇水溶液,50℃水浴恒温提取3次,每次6h,过滤,滤液合并,于50℃下减压浓缩成浸膏,得到粗提物;步骤二、萃取:粗提物按料液比(W/V)1:5~1:12加入蒸馏水,搅拌溶解,加入石油醚萃取2~5次,分离,在40~60℃下减压蒸发除去溶剂,得到石油醚萃取物;水层继续用乙酸乙酯萃取3~5次,分离,在40~60℃下减压蒸发除去溶剂,干燥得到乙酸乙酯萃取物;步骤三、HSCCC纯化:配制乙酸乙酯:正丁醇:水溶剂体系,体积比为1:1:10,充分摇匀后超声脱气,将其作为固定相以15~30ml/min流速泵入高速逆流色谱仪,待其充满整个柱子后,调节逆流色谱仪转速至800~900rpm,同时以4~6mL/min流速将流动相按以下顺序依次泵入HSCCC主机螺旋管内:200~400mL的正己烷:乙酸乙酯体系,体积比为1:1;200~400mL的正己烷:乙酸乙酯体系,体积比为1:4;200~400mL的正丁醇:乙酸乙酯体系,体积比为1:4;300~600mL的正丁醇:乙酸乙酯体系,体积比为2:1;泵入流动相的同时将溶有1g乙酸乙酯萃取物的上相泵入主机螺旋管,通过紫外检测器检测流出物,检测波长为254nm,按照色谱峰收集相应的峰组分并减压干燥,得到酪氨酸酶抑制剂。
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