[发明专利]一种从茶花粉中快速分离α‑葡萄糖苷酶抑制剂的方法

摘要

本发明公开了一种从茶花粉中快速分离α‑葡萄糖苷酶抑制剂的方法，主要包括如下步骤以茶花粉为原料，经提取、萃取、酸解处理后，采用高速逆流色谱制备分离，根据色谱图收集相应峰组分，减压浓缩干燥得3个组分，活性研究表明这3个组分均能高效抑制α‑葡萄糖苷酶活性。本发明方法生产周期短，样品用量少，分离操作简单，获得的α‑葡萄糖苷酶抑制剂活性高，确定了茶花蜂花粉降血糖的物质基础，为制备降血糖活性药物提供了适于推广的实用技术。

主权项

一种从茶花粉中快速分离α‑葡萄糖苷酶抑制剂的方法，其特征在于：包括以下步骤：步骤一、提取：取干燥粉碎的茶花粉，按料液比(W/V)1:8加入95％的乙醇，50℃水浴恒温提取8小时，过滤，滤渣重复处理3次，合并滤液并于45℃真空浓缩得茶花粉粗提物；步骤二、萃取：粗提物按料液比(W/V)1:10加入蒸馏水，搅拌溶解，依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取，均萃取3次，而后将它们分别置于50℃旋转蒸发仪中减压浓缩，得石油醚相、乙酸乙酯相及正丁醇相；步骤三、酸解：取适量乙酸乙酯萃取相，按料液比1:3～3:1(mg:mL)的比例加入无水乙醇，而后再加入等体积0.5～4mol/L的盐酸，于80～100℃水浴中酸水解15～90min，将水解液置于50℃旋转蒸发仪上减压蒸干得乙酸乙酯酸解物；步骤四、HSCCC制备分离：配制乙酸乙酯‑正丁醇‑水溶剂体系，体积比为：2:(0.8～1.4):(2.6～3.2)，充分摇匀静置30min后，将上下相分开，超声脱气，下相为固定相，上相为流动相，反接正转，将固定相以30ml/min流速泵入高速逆流色谱仪，稳定后，调节逆流色谱仪转速750～900rpm，同时流动相以5～8ml/min流速泵入HSCCC，两相达平衡后由进样阀进入样品溶液，样品溶液为乙酸乙酯酸解物，用10mL等体积上下相溶解，同时通过紫外检测器检测流出物，收集各峰组分并减压干燥，得到α‑葡萄糖苷酶抑制剂。