[发明专利]一种微藻二氧化碳同化过程中的稳定碳同位素分馏值的确定方法

摘要

本发明公开了一种微藻二氧化碳同化过程中的稳定碳同位素分馏值的确定方法分别添加两种δ13C值差值悬殊的碳酸氢钠到附加10mM乙酰唑胺的检测培养液中来培养待测微藻；获得在两种同位素标记的检测培养液培养的被考察微藻的新生藻体稳定碳同位素组成以及待测微藻利用添加的无机碳源的份额；依据上述结果以及培养期间培养环境中大气二氧化碳的平均稳定碳同位素组成获取待测微藻二氧化碳同化过程中的稳定碳同位素分馏值。本发明能在体确定稳定碳同位素分馏值，不仅能测得单个微藻种的稳定碳同位素分馏值，而且也能测定混合藻的稳定碳同位素分馏值，测得的数据可靠，结果精度高。

主权项

一种微藻二氧化碳同化过程中的稳定碳同位素分馏值的确定方法，其特征包含以下步骤：第一，选择两种δ13C值差值大于10‰的碳酸氢钠作为同位素标记1和同位素标记2分别添加到检测培养液中来培养待测微藻；测定待测微藻的起始生物量MO和微藻的起始稳定碳同位素组成δ13C的值δO；同位素标记1的碳酸氢钠的δ13C值为δC1，同位素标记2的碳酸氢钠的δ13C值为δC2；第二，将待测微藻在添加同位素标记的检测培养液中培养4天后，测定待测微藻的最终生物量MN和在两种同位素标记的检测培养液培养的被考察微藻的稳定碳同位素组成δ13C的值δS1和δS2；第三，测定在培养期间，培养环境中大气二氧化碳的平均稳定碳同位素组成δ13C的值δair；第四，计算待测微藻增值倍数P；第五，计算在两种同位素标记的检测培养液培养的被考察微藻的新生藻体稳定碳同位素组成δ13C的值δT1和δT2；第六，依据在两种同位素标记的检测培养液培养的被考察微藻的新生藻体稳定碳同位素组成δ13C的值δT1和δT2以及同位素标记1的碳酸氢钠的δ13C值δC1和同位素标记2的碳酸氢钠的δ13C值δC2计算出待测微藻利用添加的无机碳源的份额fB；第七，依据培养环境在培养期间的大气二氧化碳平均稳定碳同位素组成δ13C的值δair、待测微藻利用添加的无机碳源的份额fB、培养4天后被考察微藻的新生藻体稳定碳同位素组成δ13C的值δT1或δT2以及同位素标记1的碳酸氢钠的δ13C值δC1或同位素标记2的碳酸氢钠的δ13C值δC2，计算出待测微藻二氧化碳同化过程中的稳定碳同位素分馏值Δ；第五步骤中，将微藻的起始稳定碳同位素组成δO、待测微藻增值倍数P以及在两种同位素标记的检测培养液培养的被考察微藻的稳定碳同位素组成δS1或δS2代入方程：和计算出在两种同位素标记的检测培养液培养的被考察微藻的新生藻体稳定碳同位素组成δ13C的值δT1和δT2。