[发明专利]一种珠子参转录因子基因PjERF1的应用有效
| 申请号： | 201510561815.1 | 申请日： | 2015-09-07 |
| 公开（公告）号： | CN105087599B | 公开（公告）日： | 2018-06-15 |
| 发明（设计）人： | 葛锋;黄壮嘉;刘迪秋 | 申请（专利权）人： | 昆明理工大学 |
| 主分类号： | C12N15/29 | 分类号： | C12N15/29;C12N15/84;C12N5/10 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 650093 云*** | 国省代码： | 云南;53 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种珠子参转录因子基因PjERF1的用途，即在提高珠子参皂苷生物合成关键酶基因表达量和增加珠子参愈伤组织中皂苷含量的应用，PjERF1基因核苷酸序列如SEQ ID NO︰1 所示，编码AP2/ERF类转录因子；本发明采用功能基因组学和代谢工程相关技术证明珠子参PjERF1转录因子具有正调控珠子参皂苷生物合成的功能。将本发明所述的珠子参PjERF1转录因子基因构建到植物表达载体上并转入珠子参愈伤组织中使其过量表达，增强了珠子参皂苷合成途径关键酶基因的表达量，提高了珠子参皂苷的产量。 1 | ||
| 搜索关键词： | 珠子参 皂苷 转录因子基因 关键酶基因 生物合成 愈伤组织 表达量 功能基因组学 植物表达载体 基因核苷酸 代谢工程 过量表达 合成途径 转录因子 构建 应用 转入 调控 | ||
【主权项】：
1.一种珠子参转录因子基因PjERF1在提高珠子参皂苷合成代谢途径中关键酶基因FPS表达量和增加珠子参愈伤组织中皂苷含量的应用，其特征在于：所述珠子参转录因子基因PjERF1的核苷酸序列如SEQ ID NO︰1 所示。2.根据权利要求1所述珠子参转录因子基因PjERF1在提高珠子参皂苷合成代谢途径中关键酶基因FPS表达量和增加珠子参愈伤组织中皂苷含量的应用，其特征在于具体操作如下：
（1）将珠子参转录因子基因PjERF1与植物超表达载体pCAMBIA2300S连接，构建植物超表达载体；
（2）将上述构建的表达载体通过农杆菌介导转入珠子参愈伤组织中；
（3）通过抗生素筛选珠子参转基因细胞系，qRT‑PCR检测转基因细胞系中珠子参皂苷合成途径关键酶基因表达量；
（4）提取珠子参转基因和非转基因细胞系中的皂苷，分析转基因和非转基因细胞系间皂苷含量的差异，最后筛选出皂苷含量得到提高的阳性转基因细胞系。
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