[发明专利]一种非洲菊脱毒种苗的高效扩繁方法

摘要

本发明公开了一种非洲菊脱毒种苗的高效扩繁方法，包括以下步骤1）非洲菊脱毒苗前处理；2）不定芽的诱导；3）切割不定芽继代增殖；4）炼苗；5）水培生根处理；6）水培壮苗；7）移栽。本发明的高效扩繁方法解决了非洲菊脱毒苗扩繁过程中效率低下、易再次污染的问题，不仅能在短时间内扩繁出大量优良非洲菊脱毒种苗，而且还避免了非洲菊分株繁殖和种子繁殖所带来的品种退化问题，而且操作简单、易于工厂化推广，具有较高的生产实用价值。

主权项

一种非洲菊脱毒种苗的高效扩繁方法，其特征在于：该方法步骤如下：（1）非洲菊脱毒苗前处理：将非洲菊脱毒苗清洗干净并表面消毒，在无菌条件下切取叶柄和花托，移入装有配制好的不定芽诱导培养基广口瓶中；（2）不定芽的诱导：将接种有脱毒苗外植体的不定芽诱导培养基广口瓶置于消毒处理过的培养室中光培养，诱导出不定芽：（3）切割不定芽继代增殖：在无菌条件下将不定芽切下，移入装有增殖培养基的广口瓶中培养，得到大量非洲菊幼苗；（4）炼苗：逐步采用增强培养光照、降低培养温度的方法进行炼苗；（5）水培生根处理：将炼苗后的脱毒试管苗从广口瓶中取出，保留原有根系，再将组培苗栽于水培盘中的栽培板上，水培盘中加入生根营养液；（6）水培壮苗：生根培养7天后，倒掉生根营养液，加入壮苗营养液；（7）移栽：将脱毒苗移栽到消过毒的基质上，置于室外自然光下生长；其中，步骤（1）和（2）中的不定芽诱导培养基的配方为：MS+0.1mg/L 2,4‑D+0.2mg/L NAA+0.3mg/L IBA+0.3g/L CH +3%蔗糖+6.0g/L琼脂，pH为5.8；步骤（3）中的增殖培养基配方为：MS+3.0mg/L6‑BA+0.5mg/LNAA+0.5mg/LGA+2.5mg/L氯化胆碱+4%蔗糖+6.0g/L琼脂，pH为5.8；步骤（5）和（6）中的生根培养液配方为：500mg/L KNO3，500mg/L NH4NO3，92.5mg/L MgSO4·7H2O，173mg/L Ca (NO3)2·4H2O，150mg/L KH2PO4，32mg/L KCl，17mg/L MnSO4·7H2O，19mg/L Na2‑EDTA，14mg/L FeSO4·7H2O，2.2mg/L MnSO4·4H2O，0.8mg/L ZnSO4·7H2O，0.8mg/L H3BO3，0.4mg/L KI，50mg/L肌醇，1mg/L甘氨酸，0.05mg/LVB1，0.05mg/LVB6，混合制成生根营养液；步骤（6）中的壮苗营养液配方为：850mg/L KNO3，750mg/L NH4NO3，165mg/L MgSO4·7H2O，75mg/L KH2PO4，200mg/L CaCl2·2H2O，20mg/L Na2‑EDTA，15mg/L FeSO4·7H2O，10.5mg/L MnSO4·4H2O，4.25mg/L ZnSO4·7H2O，3.0mg/L H3BO3，0.4mg/L KI，0.12mg/L Na2MOO4·2H20，0.012mg/L CoC12·6H2O，0.012mg/L CuSO4·5H2O，0.4mg/L KI，30mg/L肌醇，0.5mg/L甘氨酸，0.05mg/LVB1，0.05mg/LVB6，混合制成壮苗营养液。