[发明专利]一种嘌呤核苷磷酸化酶的制备方法及应用有效
| 申请号： | 201510575000.9 | 申请日： | 2015-09-10 |
| 公开（公告）号： | CN105087515B | 公开（公告）日： | 2018-12-04 |
| 发明（设计）人： | 陆健;孙军勇;李玉淼 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N9/10 | 分类号： | C12N9/10;C12N15/70;C12N1/21;C12C11/00;C12C7/04 |
| 代理公司： | 北京爱普纳杰专利代理事务所(特殊普通合伙) 11419 | 代理人： | 张勇 |
| 地址： | 214122 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种嘌呤核苷磷酸化酶的制备方法及应用，属于基因工程与啤酒发酵领域。本发明以pET‑28a(+)为载体，以大肠杆菌BL21(DE3)为宿主构建得到的重组菌，经发酵培养，嘌呤核苷磷酸化酶的酶活力达到184.46U/mL，远远高于现有水平。采用本发明得到的嘌呤核苷磷酸化酶，酶活力高，能够将麦汁中的嘌呤核苷水解成游离嘌呤碱基，在啤酒发酵过程中，被酵母吸收利用，为低嘌呤啤酒的生产提供依据。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 嘌呤 核苷 磷酸化酶 制备 方法 应用 | ||
【主权项】：
1.一种制备嘌呤核苷磷酸化酶的方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)将核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示的基因，以pET28a(+)为表达载体，以大肠杆菌BL21(DE3)为宿主，构建重组菌；(2)发酵培养重组菌制备嘌呤核苷磷酸化酶，所述发酵培养是将重组菌种子液转接到LB/Kanr液体培养基中，37℃培养至对数生长期中期，加入异丙基‑β‑硫代半乳糖苷至终浓度0.05mmol/L，30℃诱导培养4‑5h。
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