[发明专利]一种生物转化法合成α-酮戊二酸的方法

摘要

本发明提供一种生物转化法合成α‑酮戊二酸的方法，所述方法以L‑谷氨酸为底物，于马克斯克鲁维酵母(Kluyveromyces marxianus)ATCC36534经转化培养基培养获得的转化培养液中，加入α‑酮戊二酸脱氢酶抑制剂，在25～30℃、200～250r/min振荡条件下进行合成转化培养，合成转化培养结束后，合成转化液经分离纯化得到所述的α‑酮戊二酸；生长状态的酵母细胞将L‑谷氨酸转化为α‑酮戊二酸，加入α‑酮戊二酸脱氢酶抑制剂，阻断了其被进一步代谢消耗，从而α‑酮戊二酸在培养基中大量积累；在底物L‑谷氨酸投料浓度为50g/L时，摩尔转化率可达83.2％；本发明把低价值的L‑谷氨酸转化高价值的α‑酮戊二酸，可大规模工业化应用，生产工艺具有周期短、转化率高和环境污染小等优点。

主权项

1.一种生物转化法合成α‑酮戊二酸的方法，其特征在于所述方法以马克斯克鲁维酵母(Kluyveromyces marxianus)ATCC36534为催化剂，以L‑谷氨酸为底物，于马克斯克鲁维酵母ATCC36534经转化培养基培养获得的转化培养液中，加入α‑酮戊二酸脱氢酶抑制剂，在25～30℃、200～250r/min振荡条件下进行转化培养，转化培养结束后，转化培养液经分离纯化得到所述的α‑酮戊二酸；所述的底物L‑谷氨酸在转化培养液中的添加量为50g/L；所述α‑酮戊二酸脱氢酶抑制剂为过氧化氢或甲氨蝶呤中的一种或两种的混合，所述过氧化氢以质量浓度30％的过氧化氢水溶液的形式加入，过氧化氢水溶液中过氧化氢的加入量以转化培养液体积计为40mmol/L；所述甲氨蝶呤以1mmol/L甲氨蝶呤水溶液的形式加入，所述甲氨蝶呤水溶液中甲氨蝶呤加入量以转化培养液体积计为0.8μmol/L；所述转化培养基的组成为：蔗糖100g/L、酵母浸出粉20g/L，KH₂PO₄5g/L，K₂HPO₄ 6.5g/L，MgSO₄ 1.0g/L，溶剂为水，pH自然。