[发明专利]一种高纯度灯盏花素提取物及制剂的制备方法及用途

摘要

本发明提供一种高纯度灯盏花素提取物及制剂的制备方法及用途。本发明以灯盏细辛为原料，采用动态超声逆流提取或加热回流提取，过滤，离心，调pH值至2.0～7.0，大孔吸附树脂柱层析，应用动态轴向压缩工业色谱分离制备，或采用高速逆流色谱分离制备，冷冻或喷雾干燥，即得高纯度灯盏花素提取物。用本发明方法可在较低温下短时间完成提取，分离周期短、效率高，节省提取容积用量，降低生产成本、减少能耗和环境污染，所得的灯盏花素纯度可达95%以上。通过添加各种药用辅料可制成普通片剂、薄膜包衣片、胶囊剂、分散片、滴丸剂、颗粒剂、缓控释制剂等固体口服制剂，以及喷雾剂、气雾剂、冻干粉针、注射液，用于治疗心脑血管疾病,疗效显著,安全可靠。

主权项

1.一种高纯度灯盏花素提取物的制备方法，其特征在于,制备方法包括：动态超声逆流提取或加热回流提取；分离过程采用大孔吸附树脂柱层析与动态轴向压缩工业色谱或高速逆流色谱联合的方法分离制备，通过以下步骤实现：将灯盏细辛全草粉碎，加6～20倍体积水或体积百分比浓度为10％～80％的醇溶液，动态超声逆流提取或加热回流提取2～3次，每次0.5～2h，过滤，合并提取液，减压回收提取溶剂，适当浓缩至浓度为0.4～2.0g生药/ml，离心或过滤后，加稀盐酸调节pH至2.0～7.0得上柱溶液，上柱溶液以2BV/h～4BV/h的流速通过大孔吸附树脂层析柱，上柱溶液按照固形物与干树脂的比例为1：5～10，先用4～6BV的蒸馏水洗涤树脂柱床，洗脱流速为2BV/h～4BV/h，弃去水洗脱液；再用体积百分比浓度为10％～80％的醇洗脱剂洗脱，洗脱流速为2BV/h～4BV/h，合并洗脱液减压回收醇，减压浓缩至相对密度为1.05～1.30，即为灯盏细辛的大孔树脂粗提物，加入200～300目的柱层析硅胶填料，加甲醇拌匀后烘干，过动态轴向压缩反向工业制备色谱柱，二氯甲烷‑甲醇、氯仿‑甲醇或甲醇‑水为流动相梯度洗脱，所述二氯甲烷与甲醇的体积比，氯仿与甲醇的体积比，甲醇与水的体积比均为6：1～2：1，分别收集含灯盏花素的主段洗脱液，合并，减压浓缩，加入10倍量二氯甲烷‑甲醇重结晶，所述二氯甲烷与甲醇的体积比为8：1～5：1，过滤，减压回收溶剂，冷冻干燥、喷雾干燥或减压干燥，即得淡黄绿色的高纯度灯盏花素，HPLC检测纯度≥95％；或取灯盏细辛的大孔树脂粗提物，加入正己烷‑乙酸乙酯‑甲醇/乙醇‑水系统或正己烷‑乙酸乙酯‑正丁醇‑水系统的下相中，震荡使完全溶解，进行高速逆流色谱分离制备；高速逆流色谱分离条件：检测波长为285nm，主机温度为25℃，正己烷‑乙酸乙酯‑甲醇/乙醇‑水为溶剂系统或正己烷‑乙酸乙酯‑正丁醇‑水系统，所述正己烷、乙酸乙酯、甲醇/乙醇、水的体积比为2：8：4：4～6，所述正己烷、乙酸乙酯、正丁醇、水的体积比为3：7：3～4：6～8，正己烷‑乙酸乙酯作为固定相，为上相，甲醇/乙醇‑水或正丁醇‑水作为流动相，为下相；将固定相以10～30ml/min流速装满色谱分离柱，调整高速逆流色谱仪主机转速为600～900rpm/min，同时以2.0～6.0ml/min的流速泵入流动相，待两相达到动态平衡，开启进样阀，样品液进样，采集数据并记录紫外色谱图，在335nm波长下回收目的流分，减压回收溶剂，冷冻或喷雾干燥，得淡黄绿色的高纯度灯盏花素提取物，HPLC检测纯度≥95％。