[发明专利]一种超声波辅助外源基因转化大肠杆菌的方法在审
申请号: | 201510594884.2 | 申请日: | 2015-09-17 |
公开(公告)号: | CN105219795A | 公开(公告)日: | 2016-01-06 |
发明(设计)人: | 杨胜利;张慧 | 申请(专利权)人: | 浙江工业大学 |
主分类号: | C12N15/70 | 分类号: | C12N15/70;C12N1/21;C12R1/19 |
代理公司: | 杭州天正专利事务所有限公司 33201 | 代理人: | 黄美娟;李世玉 |
地址: | 310014 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明公开了一种超声波辅助外源基因转化大肠杆菌的方法,所述方法为:将携带外源基因的表达质粒与大肠杆菌感受态细胞悬液混合,调节pH值至6.5~7.5,在35~37℃、超声波场强200~500W的条件下进行转化反应,转化反应结束后,筛选获得含外源基因的大肠杆菌的阳性转化子;所述大肠杆菌感受态细胞悬液是由大肠杆菌感受态细胞与二甲基亚砜混合而成;本发明所述超声波诱导基因转化方法更加环保,不依赖于细胞型,且转化率和电转化率相当,转化率达2.6×104阳性转化子/μg质粒DNA,其中产量最高的重组菌株的酶活达到1.22U/mL,较出发菌株的酶活提高了144%。 | ||
搜索关键词: | 一种 超声波 辅助 基因 转化 大肠杆菌 方法 | ||
【主权项】:
一种超声波辅助外源基因转化大肠杆菌的方法,其特征在于,所述方法为:将携带外源基因的表达质粒与大肠杆菌感受态细胞悬液混合,调节pH值至6.5~7.5,在35~37℃、超声波场强200~500W的条件下进行转化反应,转化反应结束后,筛选获得含外源基因的大肠杆菌的阳性转化子;所述大肠杆菌感受态细胞悬液是由大肠杆菌感受态细胞与二甲基亚砜混合而成。
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