[发明专利]一种β-肾上腺素受体基因多态性检测肥胖症的方法在审

专利信息
申请号: 201510596361.1 申请日: 2015-09-18
公开(公告)号: CN106544402A 公开(公告)日: 2017-03-29
发明(设计)人: 王永红 申请(专利权)人: 王永红
主分类号: C12Q1/68 分类号: C12Q1/68
代理公司: 暂无信息 代理人: 暂无信息
地址: 741000 甘*** 国省代码: 甘肃;62
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摘要: 一种β-肾上腺素受体基因多态性检测肥胖症的方法,抽提外周血基因组DNA,以190 ng DNA为模板,在总反应体积50ul进行PCR扩增,引上游引物为5-CGCCCAATACCGCCAACAC-3,下游引物为5-CCACCAGGAGTCCCATCACC-3,PCR反应条件96℃预变性10min;94℃变性40s;复性60℃,40s;延伸71℃,1min,循环30次,最后一个循环72℃延伸5min。PCR产物经2%琼脂糖凝脉电泳,紫外线透射灯下检测210b处出现荧光带为特异性PCR产物。在PCR扩增产物中加入限制性内切酶BstNI,61℃酶切3h,酶切产物用3%琼脂糖凝胺电泳,紫外灯下观察结果。
搜索关键词: 一种 肾上腺素 受体 基因 多态性 检测 肥胖症 方法
【主权项】:
一种β‑肾上腺素受体基因多态性检测肥胖症的方法,抽提外周血基因组DNA,以190 ng DNA为模板,在总反应体积50 ul进行PCR扩增,引上游引物为5‑CGCCCAATACCGCCAACAC‑3,下游引物为5‑CCACCAGGAGTCCCATCACC‑3,PCR 反应条件96 ℃预变性10 min;94 ℃变性40 s;复性60 ℃,40 s;延伸71 ℃,1 min,循环30次,最后一个循环72 ℃延伸5 min;PCR产物经2%琼脂糖凝脉电泳,紫外线透射灯下检测210 b处出现荧光带为特异性PCR产物;在PCR 扩增产物中加入限制性内切酶BstNI,61 ℃酶切3 h,酶切产物用3% 琼脂糖凝胺电泳。
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