[发明专利]一种规模纯化重组人载脂蛋白Apoa-I的方法在审
| 申请号： | 201510610860.1 | 申请日： | 2015-09-23 |
| 公开（公告）号： | CN106543266A | 公开（公告）日： | 2017-03-29 |
| 发明（设计）人： | 冯美卿;胡祥祥;韩磊;王鑫 | 申请（专利权）人： | 复旦大学 |
| 主分类号： | C07K1/34 | 分类号： | C07K1/34;C07K1/20;C07K1/18 |
| 代理公司： | 上海元一成知识产权代理事务所(普通合伙)31268 | 代理人： | 吴桂琴 |
| 地址： | 200433 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明属基因工程重组蛋白纯化技术领域，涉及一种纯化重组蛋白的方法，其包括1)发酵液离心获取上清液、上清液超滤浓缩；2)将超滤后的浓缩液进凝胶过滤层析，除去色素和盐；3)将所得液体经阴离子层析，用高盐梯度洗脱，收集目标蛋白峰；4)收集液经疏水层析获得纯度重组人载脂蛋白ApoA-I。采用本方法纯化重组人载脂蛋白Apoa-I，发酵上清液经超滤浓缩，进一步采取采用凝胶层析和疏水层析即可，最终的洗脱液为水，不必脱盐，直接冷冻干燥，获得的重组人ApoA-I纯度超过96％，回收率高于82％，每次处理量3L，本方法简单方便，工艺稳定，易于放大，能解决工业化生产重组人载脂蛋白ApoA-I的规模问题，适于生产的分离纯化。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 规模 纯化 重组 脂蛋白 apoa 方法 | ||
【主权项】：
一种规模纯化重组人载脂蛋白Apoa‑I的方法，其特征在于，其包括步骤：(1)将毕赤酵母工程菌发酵，对样品的上清超滤，浓缩，脱色；(2)对上述收集液进行阴离子交换层析，初步纯化ApoA‑I；(3)对上所述收集液进行疏水层析纯化，进一步纯化ApoA‑I。
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