[发明专利]解淀粉芽胞杆菌NCPSJ7抗菌多肽及其制备方法

摘要

本发明涉及一种解淀粉芽孢杆菌NCPSJ7抗菌多肽及其制备方法，属于抗菌多肽制备技术领域。本发明采用硫酸铵沉淀、脱盐、阴离子交换、排阻层析、疏水层析等纯化手段，纯化得到一种解淀粉芽胞杆菌NCPSJ7抗菌多肽。本发明的解淀粉芽胞杆菌NCPSJ7抗菌多肽，其分子量为3.0‑5.8KDa，对西瓜枯萎病菌最低抑菌浓度为0.031mg/mL。其表观形态为浅黄色粉末；其适用温度范围4‑80ºC；其适用pH范围1‑11。具有较强的热稳定性、耐酸碱，具有潜在的应用价值。

主权项

1.一种解淀粉芽胞杆菌NCPSJ7抗菌多肽，其特征在于，其分子量集中在3.0‑5.8KDa之间，对西瓜枯萎病菌最低抑菌浓度为0.031mg/mL；并采用以下方法制备获得：（1）解淀粉芽孢杆菌发酵液离心后于上清液中加入硫酸铵至80%的饱和度，于4ºC静置24h后离心，沉淀用B复溶，得复溶液；（2）将复溶液以B为缓冲液，用透析袋进行脱盐，得到浓缩液；（3）浓缩液用DEAE阴离子交换层析柱进行分离：用B平衡层析柱，以NaCl含量为0.4mol/L的B为洗脱液洗脱，收集洗脱峰，得活性组分1；（4）活性组分1用Superdex 75排阻层析柱分离：洗脱液为B，收集第二个洗脱峰，得活性组分2；（5）活性组分2中的缓冲液用NaCl含量为1.5mol/L的B替换后用辛基琼脂糖‑4疏水层析柱进行纯化：先进行0‑100%B线形洗脱，然后进行B‑C‑ddH2O的梯度洗脱，梯度洗脱时收集洗脱峰，得产品；所述B为pH为7.0、浓度为50 mmol/L的PBS；所述C为浓度为20mmol/L的PBS；所述透析袋的截留分子量MwCO≤3000。