[发明专利]HpychH4内切酶鉴定TERF1基因rs3863242多态性在审
| 申请号： | 201510615973.0 | 申请日： | 2015-09-24 |
| 公开（公告）号： | CN105296610A | 公开（公告）日： | 2016-02-03 |
| 发明（设计）人： | 张文娟;荆春霞;吴赤蓬;杨光;纪卫东;胡大林;杨淋清;王威 | 申请（专利权）人： | 暨南大学 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 北京迎硕知识产权代理事务所(普通合伙) 11512 | 代理人： | 张群峰;吕良 |
| 地址： | 510632 广*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | HpychH4内切酶鉴定TERF1基因rs3863242多态性。该方法包括：提供待测人基因组DNA；提供扩增人TERF1基因rs3863242位点附近序列的上游引物和下游引物，其中下游引物具有错配碱基A；以所述待测人基因组DNA为模板，利用上游引物和下游引物进行PCR扩增反应以获得含AYGT片段的扩增产物，其中Y(T或C)为人TERF1基因rs3863242位点上的待定碱基R(A或G)的互补碱基；提供限制性内切酶；利用限制性内切酶对所得扩增产物进行酶切以获得相应的酶切产物；以及根据所得酶切产物来确定人TERF1基因rs3863242位点上的待定碱基R是A还是G。本发明的测定手段不但快速可靠，而且测定成本大大降低。 | ||
| 搜索关键词： | hpychh4 内切酶 鉴定 terf1 基因 rs3863242 多态性 | ||
【主权项】：
一种测定人TERF1基因rs3863242位点多态性的方法，包括：提供待测人基因组DNA；提供扩增人TERF1基因rs3863242位点附近序列的上游引物和下游引物，其中下游引物具有错配碱基A；以所述待测人基因组DNA为模板，利用上游引物和下游引物进行PCR扩增反应以获得含AYGT片段的扩增产物，其中Y(T或C)为人TERF1基因rs3863242位点上的待定碱基R(A或G)的互补碱基；提供限制性内切酶；利用限制性内切酶对所得扩增产物进行酶切以获得相应的酶切产物；以及根据所得酶切产物来确定人TERF1基因rs3863242位点上的待定碱基R是A还是G，其中，限制性内切酶为仅能够切开ACGT片段与ATGT片段之一的限制性内切酶，在所得扩增产物上，下游引物的错配碱基A与多态位点R之间相隔一个碱基C，通过设计上游引物和下游引物的长度而使得扩增产物的总片段长度在100至300bp之间，并且下游引物的片段长度至少为35bp，使得酶切切掉部分片段占总片段的长度的百分比超过20％。
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