[发明专利]一种鱼粉中肌胃糜烂素的检测方法

摘要

本发明公开了一种鱼粉中肌胃糜烂素的检测方法，属于肌胃糜烂素的检测技术领域。本发明公开的方法包括以下步骤：样品预处理、富集和净化、在线自动化衍生程序，通过样品预处理将结合在蛋白质中的肌胃糜烂素也提取出来，通过富集和净化，将鱼粉中其他杂质以及一些酸性和中性氨基酸去除，避免对分离进行干扰，提高了鱼粉中肌胃糜烂素检测的准确性，且灵敏度高，最低检出量为1mg/kg，适合大规模样品的检测。

主权项

一种鱼粉中肌胃糜烂素的检测方法，其特征在于：包括以下步骤：（1）样品预处理取鱼粉100～500 mg加入水解管中，再加入6 mol/L的盐酸5～10 mL，旋紧盖子，放在109～111℃的干燥箱中，水解22～24 h后过滤得到水解液，再用5～10 mol/L氢氧化钠溶液调节pH值至6.8～7.2，静置后，进行离心后取上清液，得到粗提液；（2）富集和净化取3 mL甲醇和3 mL超纯水活化MCX固相萃取柱，将步骤（1）得到的粗提液注入MCX固相萃取柱进行富集，再分别以3 mL水和3 mL甲醇淋洗MCX固相萃取柱，抽干后用3～5 mL氨水‑甲醇溶液洗脱，洗脱液用40 ℃的氮气吹干，加入0.2～0.4 mol/L硼酸缓冲液0.5～1 mL，涡旋振荡1 min，然后通过0.22 µm滤膜，得到待测液；（3）在线自动化衍生程序首先吸取硼酸缓冲液10 µL，待测液20 µL，混合后，再吸取邻苯二甲醛10 µL进行混合，反应1 min后加入到色谱仪中进行检测，然后根据标准曲线计算肌胃糜烂素的含量。