[发明专利]一种信号放大方法及相关装置

摘要

本发明公开了一种信号放大方法，其用于检测靶物质，包括将具有能特异性结合不同靶物质的多种第一分子的偶联体与多种靶物质结合，偶联体还包括连接体、和与多种第一分子和连接体结合的第一颗粒；桥接体与偶联体的连接体结合，桥接体包括能特异性结合偶联体的连接体的第二分子；通过能特异性结合不同靶物质的多种第三分子分别捕获与桥接体结合后的偶联体上的多种靶物质。当桥接体的第二分子可与偶联体的第一分子结合，则偶联体上可不含有连接体。本发明还公开了使用该信号放大方法的相关装置。该同时检测多种靶物质的信号放大方法不但能够高灵敏检测靶物质，而且实现了多种靶物质的同时检测。

主权项

一种同时检测艾滋病毒P24蛋白和丙型肝炎病毒core蛋白的免疫层析试纸条，其特征在于，其制备方法为：（1）偶联体的制备：按照Frens法制备40nm胶体金颗粒；按照每毫升胶体金颗粒加入3μL0.2M碳酸钾的量调节PH；按照每毫升胶体金颗粒加入8μg艾滋病毒P24蛋白单克隆抗体Ⅰ、6μg丙型肝炎病毒core蛋白单克隆抗体Ⅰ，室温反应15min；加入牛血清白蛋白，使其终浓度为1%，室温静置15min；10000rpm离心10min；弃掉上清，加入1/10胶体金体积的重悬液重悬颗粒，其中所述重悬液为10mM PH8.0的Tris、0.5%Tween20、0.4%酪蛋白、2%蔗糖；（2）桥接体的制备：按照Frens法制备20nm胶体金颗粒；按照每毫升胶体金颗粒加入4μL0.2M碳酸钾的量调节PH；按照每毫升胶体金颗粒加入10μgBSA的单克隆抗体室温反应15min；加入酪蛋白，使其终浓度为0.2%，室温静置15min；10000rpm离心10min；弃掉上清，加入与胶体金体积相同的重悬液重悬颗粒，其中所述重悬液为10mM PH8.0的Tris、0.5%Tween20、0.4%酪蛋白、8%蔗糖；（3）第三结合垫的制备：按照5μL/cm喷偶联体于奥斯龙8964玻璃纤维素膜上，置于37℃烘干，裁成0.4cm宽，备用；（4）第二结合垫的制备：按照5μL/cm喷桥接体于奥斯龙8964玻璃纤维素膜上，置于37℃烘干，裁成0.4cm宽，备用；（5）层析膜的制备：按照1μL/cm喷涂浓度为1mg/mL的艾滋病毒P24蛋白单克隆抗体Ⅱ作为检测线T1，按照1μL/cm喷涂浓度为2mg/mL的丙型肝炎病毒core蛋白多克隆抗体Ⅱ作为检测线T2，按照1μL/cm喷涂浓度为0.2mg/mL的羊抗鼠IgG作为质控线，置于室温晾干，备用；（6）样品垫的制备：用100mM PH8.0Tris、0.5%Tween20浸泡聚酯纤维素膜，置于37℃烘干，裁成1.2cm宽，备用；（7）试纸条的组装：将样品垫、第二结合垫、第三结合垫、层析膜、吸水垫依次搭接粘贴到PVC底板上，裁成3.5mm宽的试纸条，干燥保存，备用。