[发明专利]一种来自乳酸菌重组的β-葡萄糖苷酶制备稀有人参皂苷compound K的方法

摘要

本发明公开了一种来自乳酸菌重组的β-葡萄糖苷酶制备稀有人参皂苷compound K的方法，包括下列步骤：构建泡菜乳酸菌基因组Fosmid文库、筛选产β-葡萄糖苷酶阳性克隆子、分离转化成稀有皂苷compound K糖苷酶基因、IPTG诱导过表达、研究重组酶Bgy1的特性、分析gypenoside XVII转化途径。在最适条件下，6 h内可将1.0mg mL⁻¹  gypenoside XVII与0.1mg mL⁻¹ Bgy1生成0.58mg mL⁻¹ compound K，转化率为89%。本发明反应条件温和，时间短，对环境污染少，转化率高，可实现人参皂苷compound K的工业化生产，满足医疗保健等行业对人参皂苷compound K的需要。（图3）。

主权项

一种来自乳酸菌重组的β‑葡萄糖苷酶制备稀有人参皂苷compound K的方法，包括下列步骤：①  构建泡菜乳酸菌基因组Fosmid文库；②  筛选产β‑葡萄糖苷酶阳性克隆子；③  分离转化成稀有皂苷compound K糖苷酶基因；④  PCR扩增推测的糖苷酶基因bgy1，纯化和限制性内切酶处理，与表达载体pMAL‑c5X连接，转入到大肠杆菌后，经IPTG诱导过表达；⑤  研究重组酶Bgy1的特性；⑥  分析gypenoside XVII转化途径，与重组酶Bgy1反应生成稀有人参皂苷compound K。