[发明专利]基于Sanger测序灵敏检测人类EGFR基因突变的方法及其试剂盒有效
| 申请号： | 201510666246.7 | 申请日： | 2015-10-16 |
| 公开（公告）号： | CN105256021B | 公开（公告）日： | 2018-07-24 |
| 发明（设计）人： | 黄志清;施纯玫;郑建伟;陈强;翁芳霞;王劲 | 申请（专利权）人： | 福建医科大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6886 | 分类号： | C12Q1/6886;C12Q1/6869;C12N15/11 |
| 代理公司： | 福州元创专利商标代理有限公司 35100 | 代理人： | 蔡学俊 |
| 地址： | 350005 福*** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | 本发明属于基因突变检测领域，尤其涉及利用Sanger测序灵敏检测人类EGFR基因突变的方法和试剂盒。为了克服现有人类EGFR基因突变检测方法及试剂盒的不足,本发明提供了一种基于Sanger测序灵敏检测人类EGFR基因突变的方法及其试剂盒，由于在EGFR基因片段扩增体系中引入耐热DNA连接酶和针对突变位点的特定连接引物体系，极大抑制了样品中的野生型EGFR基因片段的扩增，可以基于扩增片段条带直接判定野生型样本；或使得低突变含量样品其最终的PCR产物中突变片段的比例高于50%，从而保证了Sanger测序对于杂合基因片段体系的准确识别；本发明方法及试剂盒可以基于Sanger测序检测出样本中含量低至1%的EGFR基因突变，准确率极高，检测费用低廉并且还可能测出新的未知突变。 | ||
| 搜索关键词： | 突变 试剂盒 人类EGFR基因 灵敏检测 野生型 样本 基因突变检测 含量样品 扩增片段 扩增体系 突变检测 突变片段 突变位点 杂合基因 耐热DNA 连接酶 检测 准确率 扩增 条带 引物 判定 引入 保证 | ||
【主权项】：
1.一种基于Sanger测序灵敏检测人类EGFR基因突变的引物，其特征在于：所述引物由扩增引物组和连接引物组组成，所述连接引物组的核苷酸序列如SEQ.ID NO.9‑ SEQ.ID NO.26所示，所述引物必须同耐热DNA酶在同一反应体系下共同使用。
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