[发明专利]一种DNA提取的方法在审
申请号: | 201510672270.1 | 申请日: | 2015-10-19 |
公开(公告)号: | CN105296468A | 公开(公告)日: | 2016-02-03 |
发明(设计)人: | 刘宗伟;汤晓;吴渊虬;杨超;黄嘉伟;言梦非;管卫东 | 申请(专利权)人: | 常熟市公安局 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 江苏圣典律师事务所 32237 | 代理人: | 朱林 |
地址: | 215500 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明公开了一种DNA提取的方法,该方法包括以下步骤:1)裂解;2)离心;3)加入吸附液;4)加入磁珠;5)DNA与磁珠结合;6)磁力架吸附;7)吸去吸附液;8)第一次洗涤;9)磁力架吸附;10)第二次洗涤;11)磁力架吸附;12)烘干磁珠;13)DNA洗脱等步骤,本发明方法采用移管过程取代手工DNA提取过程中采用的离心机离心步骤,充分去除残液,实现了DNA提取的自动化(非人工),提高了DNA提取的效率。 | ||
搜索关键词: | 一种 dna 提取 方法 | ||
【主权项】:
一种DNA提取的方法,其特征在于包括以下步骤:(1)将检材放入2mL离心套装的离心套管内,加入裂解液,在56~99℃下进行裂解10~30分钟;(2)在离心机上高速离心,离心后去离心套管,保留2mL离心管以及管内裂解后产物,将离心管放置在样品板上;(3)利用吸头向离心管加入吸附液1~1.2mL;(4)将10~16μL磁珠充分悬浊后分装到离心管中;(5)将样品板置于振荡器上振荡15~20分钟,使检材内的DNA与磁珠充分吸附结合;(6)DNA吸附结束后,通过机械手将样品板置于磁力架上吸附15~30秒,使磁珠充分贴壁;(7)通过吸头将离心管内混合液体吸出;(8)第一次洗涤:在离心管中加入漂洗液,然后充分振荡混匀;(9)将样品板置于磁力架上吸附15~30秒,使磁珠充分贴壁,吸去漂洗液保留磁珠;(10)第二次洗涤:在离心管中加入漂洗液,然后充分振荡混匀,将混合后的磁珠和漂洗液一起转入干净的离心管;(11)将新离心管置于磁力架吸附30秒,吸去溶液,保留磁珠;(12)烘干磁珠:将放有新离心管的样品板置于45~56℃加热器上,使磁珠中残留漂洗溶液烘干;(13)DNA洗脱:在各离心管中加入20~40μL洗脱液并充分振荡混匀,然后置于45~56℃加热器加热15~20分钟;(14)加热结束后,将提取好的DNA产物从加热器上移开置于平台待DNA扩增使用。
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