[发明专利]鸵鸟异嗜白细胞抗菌肽的制备方法

摘要

本发明公开了鸵鸟异嗜白细胞抗菌肽的制备方法，它包括以下具体步骤：（1）鸵鸟异嗜白细胞的采集；（3）萃取（4）脱酸；（4）抗菌肽的纯化。本发明方法实现了从鸵鸟异嗜白细胞提取具有较强抗菌活性的多肽物质，为生产抗菌肽提供了一个新的途径和方法。

主权项

鸵鸟异嗜白细胞抗菌肽的制备方法，其特征在于：它包括以下具体步骤：（1）鸵鸟白细胞的采集：采集新鲜鸵鸟血液，加入10%的柠檬酸钠抗凝，经6 层纱布过滤除去血块和杂质，用0.83%氯化铵裂解红细胞，玻璃棒缓慢搅拌30 min 后，2 000 r/min 离心15 min，弃上清，收集白细胞；重复以上操作5～6 次，至上清无色为止，然后对收集物染色镜检，以保证其中不含红细胞；（2）萃取：将白细胞中加入10％的醋酸，用料理机进行搅打破碎，60 Hz超声波破碎细胞4×60 s后染色镜检白细胞是否破碎，若未破碎，重复进行破碎，至镜检无完整细胞；4℃、 15000 r/min离心20min，收集上清液即为异嗜性粒细胞胞浆内的颗粒组份；4℃下搅拌过夜，萃取得醋酸提取物；（3）脱酸：将以上方法萃取得到的醋酸提取物，经4℃、 15000 r/min离心20mi，收集上清液，旋转蒸发除去醋酸和部分水分后，真空冷冻干燥得鸵鸟异嗜白细胞抗菌肽粗品，密封包装后在‑20℃保存；（4）抗菌肽的纯化：将冻干抗菌肽粗品用0.5%甲醇溶解,再上样于层析柱，同时打开柱的下端出口，收集特征峰洗脱液再真空冷冻干燥得抗菌肽，‑20℃保存。