[发明专利]一种基于二步酶解和酶膜反应的低致敏性乳清蛋白粉及其制备方法

摘要

本发明涉及一种基于二步酶解和酶膜反应的低致敏性乳清蛋白粉及其制备方法，属于乳制品加工技术领域；以乳清为底物，利用二步蛋白酶解技术水解乳清蛋白中的致敏位点，利用膜的选择性透过作用，分离获得分子量低于1kDa的无致敏位点的蛋白水解物，用于婴儿配方乳粉的生产；本发明最终产品特点是将原料乳清分离蛋白的抗原活性降低80％以上的修饰产物。

主权项

1.一种基于二步酶解和酶膜反应的低致敏性乳清蛋白粉的制备方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：(1)利用碱性蛋白酶、胰蛋白酶和糜蛋白酶进行两步水解，去除乳清蛋白中β乳球蛋白的致敏位点，将乳清蛋白粉配置成蛋白浓度3.5％的溶液，经80℃，10分钟处理，进行两步水解，第一步水解是加入碱性蛋白酶，在60℃，pH9的条件下水解2～4小时，之后进行75℃，30分钟的热处理，第二步水解是加入胰蛋白酶和糜蛋白酶，pH7，50℃下作用1～3小时，得到乳清蛋白水解液，之后进行75℃，30分钟的热处理，碱性蛋白酶来源于源于镰孢属，胰蛋白酶来源于枯草芽孢杆菌，糜蛋白酶内肽酶来源于尼诺卡氏菌属，碱性蛋白酶与底物的质量比为1：100～1：140，胰蛋白酶与底物的比例是1：80～1：120，糜蛋白酶与底物的比例是1：800～1：1200，胰蛋白酶与糜蛋白酶的比例为3：1～7：1；(2)利用3级膜分离，将步骤(1)得到的去除致敏位点的乳清蛋白及时分离出来，实现连续生产，将步骤(1)获得蛋白酶解液经热处理后，维持在65℃过膜，用4～60kDa超滤膜从酶解液中分离出水解产物，通过膜过滤截留分子量较大的底物和蛋白酶，然后选择1kDa的超滤膜，获得乳清蛋白深度水解液，再通过纳滤膜进行浓缩和去除水分，除掉的水分循环到酶膜反应器中继续进行反应；(3)分离后，利用热浓缩技术将乳清蛋白水解液浓缩至30％；(4)喷雾干燥生产，生产一种低致敏性婴儿乳粉的配料；(5)通过酶联免疫吸附测定法分析得到的乳清蛋白联修饰产物的抗原活性，以乳清蛋白的抗原活性表示。