[发明专利]一种桑葚酒渣中矢车菊素花色苷的提取方法

摘要

本发明公开了一种桑葚酒渣中矢车菊素花色苷的提取方法，将桑葚酒渣花色苷的乙醇提取物浸膏溶于蒸馏水中，得到桑葚酒渣花色苷粗提物水溶液；将粗提物水溶液过大孔吸附树脂柱，经吸附、洗杂、洗脱后，收集洗脱液浓缩，浓缩液用乙酸乙酯萃取，合并水相，减压浓缩得到花色苷提取物浸膏；将上述浸膏用乙酸水溶液溶解，过Sephadex LH-20凝胶柱，用甲醇、蒸馏水和甲酸进行阶段梯度洗脱，收集90∶9∶1的洗脱部分，进行浓缩后冷冻干燥，将冻干粉用乙酸水溶液溶解，过Sephadex LH-20凝胶柱，然后用甲醇、蒸馏水和甲酸进行线性梯度洗脱，收集洗脱峰，进行浓缩后冷冻干燥即为桑葚矢车菊素花色苷样品。

主权项

一种桑葚酒渣中矢车菊素花色苷的提取方法，其特征在于，它包括如下步骤：(1)取压榨分离的桑葚酒渣，于35～55℃烘24h以去除挥发酸，‑18℃下冷冻至水分含量5％以下，解冻后粉碎成粉料，于4℃下密封避光保存，待用；(2)将步骤(1)得到的桑葚酒渣粉料加入5～10倍重量的85％(v/v)乙醇水溶液中，在35～50℃下浸泡4h，离心，取上清液浓缩后得到桑葚酒渣花色苷的乙醇提取物浸膏；(3)将步骤(2)得到的桑葚酒渣花色苷的乙醇提取物浸膏溶于蒸馏水中，得到桑葚花色苷粗提物水溶液；(4)将步骤(3)得到的粗提物水溶液过HPD700型大孔吸附树脂柱，充分吸附后，先用蒸馏水洗杂，再用体积百分浓度为40～60％的乙醇水溶液洗脱，收集洗脱液浓缩至0.1～0.2倍体积，浓缩液用乙酸乙酯萃取，重复萃取3次，合并水相，将水相真空旋转蒸发浓缩至无水排出，得到花色苷提取物浸膏；(5)将步骤(4)得到的花色苷提取物浸膏用体积百分浓度为0.1～0.5％的乙酸水溶液溶解，过Sephadex LH‑20凝胶柱，用甲醇、蒸馏水和甲酸进行阶段梯度洗脱，甲醇、蒸馏水和甲酸的三个梯度分别为体积比95∶4∶1、90∶9∶1和80∶19∶1，三个梯度分别洗脱30min，收集90∶9∶1的洗脱部分，进行浓缩后冷冻干燥，将冻干粉用体积百分浓度为0.1～0.5％的乙酸水溶液溶解，过Sephadex LH‑20凝胶柱，然后用甲醇、蒸馏水和甲酸进行线性梯度洗脱，甲醇、蒸馏水和甲酸的体积比由95∶4∶1线性均匀变化到90∶9∶1，线性均匀变化的时间为30min，变化至90∶9∶1后再维持30min，收集洗脱峰，进行浓缩后冷冻干燥即为桑葚矢车菊素花色苷样品。