[发明专利]一种鸡快慢羽表型的分子鉴定引物及鉴定方法

摘要

本发明涉及分子遗传学领域，具体而言，涉及一种鸡快慢羽表型的分子鉴定引物，该引物的正向引物为1305s：5’CCTCCTTGCCAAACCTTA3’；反向引物为1305a：5’ATCAGCCAGATCCGTCAG3’。该引物特异性好，扩增效率高，可用于鸡快慢羽表型的分子鉴定。本发明还提供了一种鸡快慢羽表型的分子鉴定方法，该方法与上述引物配合进行实验，操作简便，可行性高，可以解决快慢羽鉴定中存在的鉴定标准不够明确、鉴定结果准确率不高、雌雄配套系建系时间长、鉴定时间有限制的问题。 1

主权项

1.一种鸡快慢羽表型的分子鉴定引物，其碱基序列分别为SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示。

2.一种鸡快慢羽表型的分子鉴定方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)、模板DNA的提取；

2)、用SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示引物，以1)所提取的DNA为模板进行PCR扩增；

3)、将2)中PCR扩增得到的产物进行琼脂糖凝胶电泳；

4)、对3)中的电泳结果进行分析：扩增出1305bp目的条带的模板对应的为慢羽鸡；未扩增出该目的条带的模板对应的为快羽鸡。

3.如权利要求2所述的鸡快慢羽表型的分子鉴定方法，其特征在于，在步骤1)中，所述模板DNA从鸡血凝块或鸡抗凝血中提取。

4.如权利要求2所述的鸡快慢羽表型的分子鉴定方法，其特征在于，在步骤2)中，所述PCR扩增反应体系为：

所述2×Es mix是2倍浓缩的PCR扩增预混和溶液，含有Taq DNA聚合酶、Mg²⁺、dNTPs和缓冲液。

5.如权利要求4所述的鸡快慢羽表型的分子鉴定方法，其特征在于，所述正向引物和反向引物的浓度为8～12μM。

6.如权利要求4所述的鸡快慢羽表型的分子鉴定方法，其特征在于，所述DNA模板在PCR反应体系中的浓度为2.5ng/μl以上。

7.如权利要求4～6任一项所述的鸡快慢羽表型的分子鉴定方法，其特征在于，所述PCR扩增反应体系的相应反应程序中，退火温度为60℃，反应循环次数为23～35个循环。

8.如权利要求2所述的鸡快慢羽表型的分子鉴定方法，其特征在于，在步骤3)中，所述琼脂糖凝胶电泳所采用的琼脂糖为1～1.2％的琼脂糖凝胶；电泳的电压为130～150V恒压，电泳时间为20～25分钟。