[发明专利]构建高分辨率、大信息量单细胞Hi-C文库的方法有效
| 申请号： | 201510680615.8 | 申请日： | 2015-10-19 |
| 公开（公告）号： | CN106591955B | 公开（公告）日： | 2019-10-29 |
| 发明（设计）人： | 李小林;张介中;赵红梅;裴志华;玄兆伶;李大为;梁峻彬;陈重建 | 申请（专利权）人： | 浙江安诺优达生物科技有限公司;安诺优达基因科技（北京）有限公司;安诺优达（义乌）医学检验有限公司 |
| 主分类号： | C40B50/06 | 分类号： | C40B50/06;C12Q1/6869 |
| 代理公司： | 北京彩和律师事务所 11688 | 代理人： | 闫桑田 |
| 地址： | 322000 浙江省义乌市*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明提供一种构建高分辨率、大信息量单细胞Hi‑C文库的方法。该方法起始样本量少、分辨率高、信息量大、且操作简便。本发明的构建Hi‑C文库的方法包括下述步骤：获得少量的被固定化的染色质；对所述步骤B中获得的被固定化的染色质进行消化，得到被固定化的染色质片段；将所述步骤C中得到的被固定化的染色质片段直接进行重新连接，得到重新连接的被固定化的染色质片段；使所述步骤D中得到的重新连接的被固定化的染色质片段解除固定化，释放DNA片段；对所述步骤E中释放的DNA片段进行扩增，得到扩增产物；以及，以所述扩增产物作为待测序DNA片段，构建测序用DNA文库。 | ||
| 搜索关键词： | 固定化 染色质片段 构建 重新连接 文库 大信息量 高分辨率 扩增产物 染色质 测序 起始样本 释放 分辨率 扩增 信息量 消化 | ||
【主权项】：
1.一种构建Hi‑C文库的方法，该方法包括下述步骤：步骤B：获得少量的被固定化的染色质，所述少量的被固定化的染色质是10‑6～102ng的染色质，以裸DNA计；步骤C：对所述步骤B中获得的被固定化的染色质进行消化，得到被固定化的染色质片段；步骤D：将所述步骤C中得到的被固定化的染色质片段直接进行重新连接，得到重新连接的被固定化的染色质片段；步骤E：使所述步骤D中得到的重新连接的被固定化的染色质片段解除固定化，释放DNA片段；步骤F：对所述步骤E中释放的DNA片段进行扩增，得到扩增产物；以及步骤H：以所述扩增产物作为待测序DNA片段，构建测序用DNA文库。
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