[发明专利]一种可检测和去除甲基乙二醛的超分子水凝胶及制备方法

摘要

本发明公开了一种可检测和去除甲基乙二醛的超分子水凝胶及制备方法，特征是依次通过氨基保护反应、固相多肽合成和氨基脱保护反应得到水凝胶的前体，该水凝胶的前体在磷酸缓冲液中与等物质的量甲基乙二醛反应形成超分子水凝胶；由于该溶液‑凝胶转换过程是可视化的，可实现甲基乙二醛的实时可视化定性检测；由于该水凝胶的前体在磷酸缓冲液中与甲基乙二醛的反应高效，可实现甲基乙二醛的去除；根据该水凝胶的前体在磷酸缓冲液中与一氧化氮反应得到暗红色溶液，证明一氧化氮对甲基乙二醛的检测不构成干扰。与传统方法相比，采用本发明方法不依赖仪器且反应简单直接方便、条件易得，可用于检测和去除甲基乙二醛，从而可进一步应用于疾病的诊断和治疗。

主权项

1.一种可检测和去除甲基乙二醛的超分子水凝胶的制备方法，包括依次通过氨基保护反应、固相多肽合成和氨基脱保护反应得到水凝胶前体邻苯二胺‑苯丙氨酸‑苯丙氨酸然后与甲基乙二醛反应成胶，其特征在于：第一步，按：将1毫摩尔3,4‑二氨基苯甲酸溶于8毫升10％碳酸氢钠溶液，加入7毫升N，N‑二甲基甲酰胺，于冰水浴中搅拌均匀；将2.4毫摩尔氯甲酸‑9‑芴基甲酯溶于8毫升N，N‑二甲基甲酰胺逐滴加入溶液中，在0℃条件下反应1小时，然后在室温条件下反应8小时；向反应混合液中加入30毫升水，用乙醚萃取两次；在冰水浴条件下向萃取得到的水相中逐滴加入浓度为2摩尔/升的盐酸至溶液pH值为2；用乙酸乙酯萃取三次，所得有机相用饱和氯化钠溶液洗涤并用硫酸钠固体干燥后旋转蒸发干燥；得到的固体即结构为的初产物N，N‑双芴甲氧羰基‑3,4‑二氨基苯甲酸；第二步，将0.5克2‑氯三苯甲基氯树脂在2‑3毫升N，N‑二甲基甲酰胺里溶胀4‑8分钟后，加入0.5毫摩尔N‑芴甲氧羰基‑苯丙氨酸，再加入0.5毫摩尔N，N‑二异丙基乙胺，反应2‑3小时后，用100微升甲醇反应5‑10分钟；去除反应溶液，加入3毫升20％哌啶的N，N‑二甲基甲酰胺溶液，反应12分钟，切去苯丙氨酸的保护基9‑芴甲氧羰基；加入活化的0.6毫摩尔N‑芴甲氧羰基‑苯丙氨酸反应2‑3小时，去除反应溶液，加入3毫升20％哌啶的N，N‑二甲基甲酰胺溶液，反应12分钟，切去苯丙氨酸的保护基9‑芴甲氧羰基；加入活化的0.6毫摩尔化合物N，N‑双芴甲氧羰基‑3,4‑二氨基苯甲酸反应2‑3小时，去除反应溶液，使用异丙醇和正己烷洗涤；最后用体积浓度为1％的三氟乙酸的二氯甲烷溶液从该树脂上切下合成的化合物，使用高效液相色谱纯化后得到结构为的化合物N，N‑双芴甲氧羰基邻苯二胺‑苯丙氨酸‑苯丙氨酸；以上固相合成所用的氨基酸都是以9‑芴甲氧羰基作为α‑氨基保护基；其中活化氨基酸的试剂是与氨基酸等物质的量的N，N‑二异丙基乙胺、1‑羟基苯并三唑和苯并三氮唑‑N,N,N',N'‑四甲基脲六氟磷酸盐；在每接上一个氨基酸和切去9‑芴甲氧羰基保护基时，都采用凯氏测试试剂检测氨基存在与否：若阳性，显蓝色，即表明已脱除9‑芴甲氧羰基保护基；若阴性，显黄色，则表明氨基酸已接上；第三步，将N，N‑双芴甲氧羰基邻苯二胺‑苯丙氨酸‑苯丙氨酸加入10％哌啶的N，N‑二甲基甲酰胺溶液中反应5分钟，用高效液相色谱纯化得到的固体即结构为的产物邻苯二胺‑苯丙氨酸‑苯丙氨酸；再将5微摩尔邻苯二胺‑苯丙氨酸‑苯丙氨酸溶于200微升的0.2摩尔/升pH 7.4的磷酸缓冲液，加热至完全溶解，冷却至室温后得到无色澄清的溶液；加入等物质的量的甲基乙二醛，静置1小时，得到略浑浊的超分子水凝胶。