[发明专利]一种花榈木组培消毒灭菌配方和组培方法

摘要

本发明公开了一种花榈木组培消毒灭菌配方和组培方法，籽苗茎段以70%乙醇消毒30s + 0.1%升汞灭菌8min+70%乙醇消毒30s +植物组织培养抗菌剂0.5ml/L的消毒效果最好；幼苗外植体采集最佳时间为4月份，茎段用70%酒精浸泡30s+（50mg/L利福平+50mg/L氯霉素）混合液浸泡30min +0.1%升汞浸泡8min消毒效果最好，叶片用70%酒精浸泡30s+（50mg/L利福平+50mg/L氯霉素）混合液浸泡30min +0.1%升汞浸泡6min消毒效果最好。成年植株叶片以4月份采集较好，用70%酒精浸泡30s+（50mg/L利福平+50mg/L氯霉素）混合液浸泡30min+0.1%升汞浸泡12min。本发明通过不同的消毒方法对花榈木外植体的籽苗、幼苗和成年植株组培进行消毒，能够获得较好的成活率，并且大大扩展了花榈木组培繁殖材料的来源，针对消毒时间的控制能够大大提高花榈木的组培效果。

主权项

1.一种花榈木组培方法，其特征在于：组培方法包括以下步骤：(1)外植体的采集：采用当年生花榈木播种幼苗的叶片外植体，采集时间为4月份；(2)清洗：采用洗涤剂浸泡30分钟，用流水冲洗1小时；(3)消毒：将步骤(2)中洗净的外植体拿入无菌工作台内，依次采用70％酒精、50mg/L利福平和50mg/L氯霉素混合液以及0.1％的升汞浸泡，其浸泡时间分别为0.5分钟、30分钟和6分钟，每次消毒处理后均用无菌水冲洗外植体4‑5次；(4)接种：将步骤(3)中清洗后的外植体接种在诱导培养基上，所述诱导培养基为MS培养基及附加成分；(5)培养：将步骤(4)中放置在诱导培养基中的外植体放入到培养箱中进行培养，采用培养条件为：温度23‑27℃，光强2500‑3000lx，白天光照12小时；所述MS培养基成分如下：所述诱导培养基的附加成分为6‑BA2.0mg/L，NAA 1.0mg/L，琼脂8g/L，蔗糖30g/L。