[发明专利]一种提高人金属硫蛋白MT2a原核表达载体表达量的方法在审
申请号: | 201510702740.4 | 申请日: | 2015-10-26 |
公开(公告)号: | CN105238802A | 公开(公告)日: | 2016-01-13 |
发明(设计)人: | 李万波 | 申请(专利权)人: | 盘古基因生物工程(南京)股份有限公司 |
主分类号: | C12N15/69 | 分类号: | C12N15/69;C12N15/12;C12N15/70 |
代理公司: | 南京天华专利代理有限责任公司 32218 | 代理人: | 傅婷婷;徐冬涛 |
地址: | 210032 江苏省南京市*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明公开了一种提高人金属硫蛋白MT2a原核表达载体表达量的方法。该方法包括:人工合成密码子优化的MT2a DNA分子,该分子还包括DNA内切酶识别序列NcoI、SpeI、NheI;将所述DNA分子构建到pET28a(+)的NcoI/NheI克隆区;再经过系列重组使包含核糖体结合区的MT编码基因扩增到4拷贝。本发明的方法适用于所有小分子多肽(100个氨基酸以内的)表达载体的构建,整个过程操作简单,快速,所制备的原核表达载体提高了MT蛋白的表达量,降低了成本,提高了工作效率。 | ||
搜索关键词: | 一种 提高 金属 蛋白 mt2a 表达 载体 方法 | ||
【主权项】:
一种提高人金属硫蛋白MT2a原核表达载体表达量的方法,其特征在于包括将含经密码子优化后的人金属硫蛋白分子MT2a的编码区的串联单位在原核表达载体克隆区串联重复4次形成包含4拷贝人金属硫蛋白顺反子的串联重复区;将含串联重复区的原核表达载体转化原核宿主细胞;培养并大量繁殖该细胞,利用诱导剂诱导导人金属硫蛋白分子表达。
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