[发明专利]一种原核生物小RNA的高通量文库构建方法在审
| 申请号： | 201510708713.8 | 申请日： | 2015-10-27 |
| 公开（公告）号： | CN105297144A | 公开（公告）日： | 2016-02-03 |
| 发明（设计）人： | 郑洪坤;关宁;方涛 | 申请（专利权）人： | 北京百迈客生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C40B50/06 | 分类号： | C40B50/06;C12N15/10 |
| 代理公司： | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人： | 王文君 |
| 地址： | 101300 北京市顺*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种针对原核生物小RNA的高通量文库构建方法。该构建方法包括以下步骤：(1)消化总RNA中的DNA；(2)去除rRNA；(3)使用随机引物，合成cDNA第一条链；(4)合成cDNA第二条链；(5)电泳切胶筛选原核生物小RNA；(6)末端修复，加A，加接头后纯化，纯化产物PCR扩增，上机文库纯化，构建上机文库。本发明方法将原核生物小RNA的分离调整至合二链转化为cDNA以后，可以避免在RNA水平上的分离造成的RNA降解，大幅度地降低测序数据中rRNA的比例，获得完整的原核生物小RNA序列。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 生物 rna 通量 文库 构建 方法 | ||
【主权项】：
一种原核生物小RNA的高通量测序文库构建方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)去除总RNA中的基因组DNA；(2)去除总RNA中的rRNA序列；(3)使用随机引物，以RNA为模板，合成cDNA的第一条链；(4)以cDNA的第一条链为模板，合成cDNA的第二条链；(5)电泳分离原核生物小RNA逆转录的cDNA；(6)对分离的cDNA进行末端修复，加A，加接头后纯化，纯化产物PCR，上机文库纯化，构建上机文库。
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