[发明专利]一种用流式细胞术鉴定蓝莓倍性的方法在审

专利信息
申请号: 201510712049.4 申请日: 2015-10-28
公开(公告)号: CN105259097A 公开(公告)日: 2016-01-20
发明(设计)人: 苏上;赵丽娜;王亮生;王贺新;徐国辉 申请(专利权)人: 中国科学院植物研究所
主分类号: G01N15/14 分类号: G01N15/14
代理公司: 北京海虹嘉诚知识产权代理有限公司 11129 代理人: 高芬芳
地址: 100093 *** 国省代码: 北京;11
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摘要: 发明公开了一种用流式细胞术鉴定蓝莓倍性的方法。本发明所提供的用流式细胞术鉴定蓝莓倍性的方法,用改良MgCl2·Tris细胞核分离缓冲液获得细胞悬液,用DAPI染料快速染色,并通过流式细胞仪的弧光灯激发DAPI,检测不同蓝莓样品的荧光累积情况,并与同类型已知倍性的蓝莓品种的荧光峰值进行比较,可简便、快速、批量鉴定蓝莓倍性。
搜索关键词: 一种 用流式 细胞 鉴定 蓝莓 方法
【主权项】:
一种用流式细胞术鉴定蓝莓倍性的方法,包括如下步骤:(1)配制包含如下组分的细胞核分离缓冲液:200mM Tris、4mM MgCl2·6H2O、体积百分比为0.5%‑2%的Triton X‑100;50mMβ‑巯基乙醇;5mg‑5g/50ml聚乙烯吡咯烷酮;30mM二硫苏糖醇;(2)向每克蓝莓叶片样品中加入4‑10ml所述步骤(1)配制的细胞核分离缓冲液;(3)将所述步骤(2)中的蓝莓叶片切碎后,过滤,收集滤液;(4)将所述步骤(3)的滤液离心,弃上清,加入所述步骤(1)配制的细胞核分离缓冲液重悬沉淀物;(5)加入4,6‑联脒‑2‑苯基吲哚,染色;(6)用流式细胞仪进行检测。
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