[发明专利]一种金黄垂直链霉菌HN6的固体发酵方法

摘要

本发明公开了一种金黄垂直链霉菌HN6的固体发酵方法，包括以下步骤：菌种活化；一级种子制备；二级种子制备；三级种子制备：按照10%的接种量将二级种子接入固体发酵培养基中，搅拌均匀，放入浅盘内，在无菌培养室保持湿度50%-70%，温度28℃培养96h，制得三级种子；和固体发酵，将配制好的固体发酵培养基加入到固体发酵罐内，将三级种子按照接种量10%接入固体发酵培养基，搅拌均匀，保持湿度60%-70%和温度28℃，发酵培养96小时，获得固体发酵培养物。本发明有益效果：成本低廉，最终发酵产物活菌浓度可达6.0-8.7×10⁹cfu g^-1，发酵效率高；固体培养物对盆栽香蕉的枯萎病有很好的防治作用。

主权项

一种金黄垂直链霉菌HN6的固体发酵方法，其特征在于，包括以下步骤：1）菌种活化：将菌种以划线法接种在扩大培养基上，28℃恒温培养5天，其中所述菌种为金黄垂直链霉菌HN6（Streptomyces aureoverticillatus HN6）；2）一级种子制备：将活化的金黄垂直链霉菌HN6制成浓度为10⁹cfu g^‑1孢子悬浮液，然后按照5%的接种量接种于装有一级种子培养液的三角瓶中，180转/分钟搅拌，28℃下培养72小时，制得一级种子，备用；3）二级种子制备：将制备好的一级种子培养液按照5%接种量接种在装有二级种子培养液的三角瓶中，180 转/分钟搅拌，28℃下培养72小时，制得二级种子，备用；4）三级种子制备：按照10%的接种量将二级种子接入固体发酵培养基中，搅拌均匀，放入浅盘内，在无菌培养室保持湿度50%‑70%和温度28℃，培养96小时，制得三级种子；5）固体发酵，将配制好的固体发酵培养基加入到固体发酵罐内，装料系数为50%‑60%，115℃高温高压灭菌30分钟；待罐内培养基冷却至30‑40℃时，将三级种子按照接种量10%接入固体发酵培养基，搅拌均匀，保持湿度60%‑70%和温度28℃，发酵培养96 小时，获得金黄垂直链霉菌HN6固体发酵培养物。