[发明专利]五种食源性致病菌的检测试剂盒及检测方法

摘要

本发明公开了五种食源性致病菌的检测试剂盒及检测方法，属于分子生物学和食品安全检测领域，该试剂盒主要包括以下组分：沙门氏菌的引物对；金黄色葡萄球菌的引物对；大肠杆菌O157:H7的引物对；副溶血弧菌的引物对；单核细胞增生李斯特菌的引物对；Taq DNA聚合酶；10×聚合酶链式反应缓冲液；脱氧核糖核苷三磷酸；MgCl₂。检测时，制备待测样品聚合酶链式反应模板，加入到试剂盒中进行聚合酶链式反应扩增，再将扩增产物进行电泳与阳性对照即可。本发明的检测方法可同时检出食品中的5种致病菌，检测灵敏度高；检测程序简单、易推广。

主权项

1.五种食源性致病菌的检测试剂盒，其特征在于，该试剂盒包括以下组分：（1）沙门氏菌的引物对：上游引物5’－GTC CAG CTC TGT CGC CTT AAT C－3’，下游引物5’－ACG GCT CCC TGC TAC GCT－3’，浓度为0.3‑0.5μmol/L；（2）金黄色葡萄球菌的引物对：上游引物5’－TCT GAT TCA ATT CGT GTT TAC TAT GA－3’，下游引物5’－CGC TAC CTT TAG GCA CTG ACA－3’，浓度为0.3‑0.5μmol/L；（3）大肠杆菌O157:H7的引物对：上游引物5’－TAT TTG ATG ATG ATC CAG GGG－3’，下游引物5’－ATT TTG TTC TCC GTC TTG TCC TA－3’，浓度为0.3‑0.5μmol/L；（4）副溶血弧菌的引物对：上游引物5’－ACT AAG TTG GTC GGT TCG ATA TG－3’，下游引物5’－TCT GGC TGC TTA GTT TGT GTT TAG－3’，浓度为0.3‑0.5μmol/L；（5）单核细胞增生李斯特菌的引物对：上游引物5’－GTT AAT GAA CCT ACA AGA CCT TCC－3’，下游引物5’－AAC CGT TCT CCA CCA TTC CCA－3’，浓度为0.7‑0.9μmol/L；（6）Taq DNA聚合酶浓度为：0.5‑1.5 U/μL；（7）10×聚合酶链式反应缓冲液：8‑12vt%；（8）脱氧核糖核苷三磷酸浓度为：0.1‑0.3 mmol/L；（9）MgCl₂浓度为：1‑3 mmol/L。