[发明专利]卷烟烟气中芳香胺类化合物体外诱导上皮细胞中MUC5AC表达的检测方法在审
| 申请号： | 201510727796.5 | 申请日： | 2015-10-30 |
| 公开（公告）号： | CN105296624A | 公开（公告）日： | 2016-02-03 |
| 发明（设计）人： | 周国俊;储国海;肖卫强;史春云;尹洁;刘金莉;徐建;许成云;吴希美 | 申请（专利权）人： | 浙江中烟工业有限责任公司 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12Q1/66;C12Q1/02;C12N15/85 |
| 代理公司： | 杭州天勤知识产权代理有限公司 33224 | 代理人： | 刘静静 |
| 地址： | 310009 浙江*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种卷烟烟气中芳香胺类化合物体外诱导上皮细胞中MUC5AC表达的检测方法，包括：步骤1，以pGL6为质粒载体，构建含有MUC5AC启动子的质粒；步骤2，将步骤1所得质粒转染入人气道上皮细胞16HBE中，得到MUC5AC-promotor-pGL6-16HBE细胞；步骤3，在步骤2所得细胞中加入卷烟烟气中的芳香胺类化合物，作用至少48h；步骤4，对步骤3的作用产物进行荧光素酶活性检测，依据所得的荧光素酶活性，得到上皮细胞中MUC5AC的诱导表达倍数。本发明提供的检测方法，操作简单，方便快速，灵敏度高，能够准确检测卷烟主流烟气中芳香胺类物质对人气道上皮细胞中MUC5AC表达的诱导作用。 | ||
| 搜索关键词： | 卷烟 烟气 芳香 化合物 体外 诱导 上皮细胞 muc5ac 表达 检测 方法 | ||
【主权项】：
一种卷烟烟气中芳香胺类化合物体外诱导上皮细胞中MUC5AC表达的检测方法，其特征在于，包括：步骤1，以pGL6为质粒载体，构建含有MUC5AC启动子的MUC5AC‑promotor‑pGL6质粒；步骤2，将MUC5AC‑promotor‑pGL6质粒转染入人气道上皮细胞16HBE中，得到MUC5AC‑promotor‑pGL6‑16HBE细胞；步骤3，在MUC5AC‑promotor‑pGL6‑16HBE细胞中加入卷烟烟气中的芳香胺类化合物，作用至少48h；步骤4，对步骤3的作用产物进行荧光素酶活性检测，依据所得的荧光素酶活性，得到上皮细胞中MUC5AC的诱导表达倍数。
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