[发明专利]茶多酚或EGCG与β-CD包合物及制备富含茶多酚或EGCG的通用固体培养基的方法

摘要

本发明公开了一种茶多酚或EGCG与β‑CD包合物及其用于制备富含茶多酚或EGCG的适合真菌培养的通用固体培养基的方法。通用固体培养基的制备方法如下：按茶多酚或EGCG与β‑CD的摩尔比例为1:1称取茶多酚或EGCG，将茶多酚或EGCG溶于无水乙醇中，将所得第一次混合溶液逐滴加入到β‑CD饱和溶液中，再将所得第二次混合溶液在60℃条件下搅拌，然后4℃静置过夜，并冷冻干燥，制得包合物粗品；用甲醇冲洗包合物粗品粉末并蒸干，即可制得CDTP或CDTE；最后将CDTP或CDTE配置成通用固体培养基。本发明成功地利用β‑CD疏水空腔的包合性，制备得到了富含茶多酚或EGCG的固体培养基，为后期研究微生物对茶多酚的代谢的研究和生产奠定了基础，本发明还为有效开发利用茯砖茶以及其他茶叶提供了广阔的前景。

主权项

1.一种制备富含茶多酚或EGCG的适合真菌培养的通用固体培养基的方法，该方法首先制备茶多酚与β‑CD包合物CDTP或EGCG与β‑CD包合物CDTE，所述茶多酚与β‑CD包合物CDTP或EGCG与β‑CD包合物CDTE的制备方法包括以下步骤：1)、制备β‑CD饱和溶液取经重结晶后的纯β‑CD，置烧杯中，加蒸馏水，在60±1℃条件下制成饱和水溶液，保温，备用；2)、称取茶多酚或EGCG，所称取的茶多酚或EGCG与前述饱和水溶液中β‑CD的摩尔比例均为1:1，将称取得到的茶多酚或EGCG溶于无水乙醇中得到第一次混合溶液，再将第一次混合溶液逐滴加入到步骤1)制备的β‑CD饱和溶液中得到第二次混合溶液，将第二次混合溶液在60℃条件下搅拌若干小时，然后4℃静置过夜，再将其置于冷冻干燥器中冷冻干燥，即制得包合物粗品；取包合物粗品粉末，用甲醇冲洗所述包合物粗品粉末，并将冲洗后的包合物粗品粉末进行蒸干，即可制得茶多酚与β‑CD包合物CDTP或EGCG与β‑CD包合物CDTE；步骤2)中，将第二次混合溶液在60℃条件下置于磁力搅拌器上磁力搅拌4h；步骤2)中，所述冷冻干燥器为真空冷冻干燥器，冷冻温度为‑80℃；步骤2)中，所述茶多酚或EGCG与无水乙醇的摩尔比例为7:85；步骤2)中，所述包合物粗品粉末与冲洗用甲醇之间摩尔比例为(1～3):62；所制得的茶多酚与β‑CD包合物CDTP或EGCG与β‑CD包合物CDTE用于制备适合真菌培养的通用固体培养基；其特征在于包括以下步骤：称取一定量的PDA培养基，高压蒸汽灭菌处理，并冷却至60℃待用；将前述制备的包合物CDTP或包合物CDTE进行微波灭菌1min，待用；在已灭菌处理的培养皿中分别加入所述20mL PDA，加入0.4500g CDTP或CDTE，用已灭菌处理的玻璃棒搅拌，使其均匀混合在PDA中，待冷却，即制得富含茶多酚培养基CDTP‑PDA或富含EGCG培养基CDTE‑PDA。