[发明专利]一种爬山虎叶固化水体脱氮微生物制剂的制备方法

摘要

本发明公开了一种爬山虎叶固化水体脱氮微生物制剂的制备方法，属于微生物制剂制备领域。本发明微生物制剂是取爬山虎树叶处理得碎叶备用，取甘露醇、胰蛋白胨、淀粉和琼脂制得微生物培养基，将处理后的池塘污泥置于培养基中培养，与无菌水混合过滤得滤液接种至微生物培养基上，添加营养液反复培养，与无菌水混合过滤得滤液，离心分离后得脱氮生物菌种，再与备用的爬山虎碎叶屑、甘油和脱脂乳混合，经烘干过筛制得。本发明的有益效果是：本发明制得的微生物制剂性状稳定，有效活菌数多，易保存，保存期为10～18个月；制备方法简单，成本低，处理时耗时短，脱氮率达92%以上，值得推广与使用。

主权项

一种爬山虎叶固化水体脱氮微生物制剂的制备方法，其特征在于具体制备步骤为：（1）选取夏季生长1～2月的爬山虎树叶，将其取下并冲洗干净，将其置于阳光下暴晒至完全枯黄脱水，并将其进行揉搓挤压至爬山虎叶子完全与主茎脉分离，收集破碎叶片并置于气流粉碎机中粉碎过筛，制得100～120目爬山虎碎叶屑备用；（2）按重量份数计，选取20～65份的甘露醇、5～15份的胰蛋白胨、15～20份的淀粉和20～45份的琼脂，搅拌混合形成培养基，并加入去离子水调节pH为5.0～5.5即可，待调节完pH后，对其升温至120℃灭菌10～20min，制得微生物培养基；（3）选取需要治理的池塘污泥，将其置于阴凉处风干至含水量为60～70%，随后按20g/份将风干后的池塘污泥置于上述制备的微生物培养基中，在18～20℃下培养2～3周，随后将培养完成的培养基和无菌水按质量比1:10进行混合搅拌并对其过滤，收集滤液1；（4）将收集的滤液1接种至步骤（2）制备的培养基上，进行培养，培养2～3天后滴加20mL含有2mL质量浓度为10%的氨水溶液的营养液，随后每隔2～3天将掺加的氨水浓度提高5%，直至氨水溶液浓度为80%后，停止滴加营养液培养5～7天，收集培养基并按质量比1:10，将培养基和无菌水按搅拌混合并对其过滤，收集滤液2；（5）将收集的滤液2在18～20℃下，置于12000～15000r/min下离心分离10min，弃去上清液，收集脱氮生物菌种，按质量份数计，分别选取10～35份步骤（1）备用的爬山虎碎叶屑、5～10份脱氮生物菌种、20～30份甘油和40～50份脱脂乳搅拌混合，随后将其置于30～40℃下烘干并过筛，得粒径大小为1～2mm的爬山虎叶固化水体脱氮微生物制剂。