[发明专利]大熊猫抗细菌潜力检测的II类MHC基因的特异性引物及分型方法在审
申请号: | 201510740131.8 | 申请日: | 2015-11-03 |
公开(公告)号: | CN105274233A | 公开(公告)日: | 2016-01-27 |
发明(设计)人: | 方盛国;万秋红;陈艺燕 | 申请(专利权)人: | 浙江大学 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12N15/11 |
代理公司: | 杭州求是专利事务所有限公司 33200 | 代理人: | 郑海峰 |
地址: | 310027 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明公开了大熊猫抗细菌潜力检测的II类MHC基因的特异性引物及分型方法。引物序列如序列表所示,大熊猫II类MHC区域DRA、DRB3、DQA1、DQA2、DQB1和DQB2基因二号外显子的分型方法是采用所述的扩增产物,用单链构象多态性对目标片断进行基因分型。II类MHC负责结合及呈递细菌抗原,从而激发相应免疫反应,本发明有利于正确进行大熊猫II类MHC基因分型和基因多态性分析,因此能帮助我们进一步研究与细菌引起的疾病有关的特定等位基因、评估大熊猫抗病能力以及更好地进行大熊猫保护育种。 | ||
搜索关键词: | 大熊猫 细菌 潜力 检测 ii mhc 基因 特异性 引物 方法 | ||
【主权项】:
用于扩增大熊猫II类MHC区域DRA、DRB3、DQA1、DQA2、DQB1和DQB2基因二号外显子的特异性引物组,其特征在于包括十对引物,引物对的核苷酸序列如下所示:引物对一:上游引物DRAF:GTCTCACATCCCGGGTTCTTCTT;下游引物DRAdn:TTTCAAAGTTAGGATTCCCGTGTCT;引物对二:上游引物RAF:TTCCTCTCCCCCTCCTGGTTCC;下游引物RAR:TAGGATTCCCGTGTCTAGGAGTGC;引物对三:上游引物DRB1F2:GAGCCCGCGGGTGAGCGGATC;下游引物RB13dn4:CCACACAGTCCCTGACGTCT;引物对四:上游引物DRB1F3:AGCGGATCGTCTCTGTCCCCA;下游引物RB13dn3:CCCTGTATGTTCACTCCGGATGT;引物对五:上游引物DQA1up3:CTGTCACTTGGTTTAGTAATACTCT;下游引物DQA1dn1:CATTGGTAGCAGCGGTATAGTTGGA;引物对六:上游引物DQA2up1:GTTTCTTCCGTCACTTGGCTTAATAAG;下游引物DQA2dn1:AGGCAGAGCATTGGACACATACCAT;引物对七:上游引物DQB1F1:TTTTACTGAGTCCTCAAGCTCA;下游引物DQBdn:GCGCGAACGGCCTGGCTCAC;引物对八:上游引物DQBup1:AGTGACCCGCGGTGATTCCC;下游引物DQBdn:GCGCGAACGGCCTGGCTCAC;引物对九:上游引物DQB2F1:TTGTTTTACTCAGTTATCAGACTGG;下游引物DQB2dn:GAGGCGGAAGGGGGCGCCGCG;引物对十:上游引物DQBup3:GTAGTGCTGCACAAGGACTGCC;下游引物DQB2dn:GAGGCGGAAGGGGGCGCCGCG;引物对一、引物对二扩增DRA,其中引物对一为巢式PCR外侧引物,引物对二是巢式PCR内侧引物;引物对三、引物对四扩增DRB3,其中引物对三为巢式PCR外侧引物,引物对四是巢式PCR内侧引物;引物对五扩增DQA1;引物对六扩增DQA2;引物对七、引物对八扩增DQB1,其中引物对七为巢式PCR外侧引物,引物对八是巢式PCR内侧引物;引物对九、引物对十扩增DQB2,其中引物对九为巢式PCR外侧引物,引物对十为巢式PCR内侧引物。
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