[发明专利]半导体芯片高通量合成核苷酸池及组装双链DNA的方法有效
| 申请号： | 201510744149.5 | 申请日： | 2015-11-05 |
| 公开（公告）号： | CN105274088A | 公开（公告）日： | 2016-01-27 |
| 发明（设计）人： | 刁文一;齐金才;柳伟强;孙德斌;杨平 | 申请（专利权）人： | 苏州泓迅生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 苏州慧通知识产权代理事务所(普通合伙) 32239 | 代理人： | 黄建月 |
| 地址： | 215123 江苏省苏州市工*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明涉及半导体芯片高通量合成核苷酸池及组装双链DNA的方法，包括以下步骤：(1)将预合成的双链DNA分成多个DNA片段；(2)用DNA片段设计核苷酸；(3)以核苷酸作为引物，在引物的两端分别加上序列，合成核苷酸序列，核苷酸序列通过半导体芯片制备；(4)用含有生物素标记的引物进行第一轮扩增；(5)用至少一种重组酶重组第一轮PCR产物；(6)纯化PCR混合物；(7)进行第二轮PCR，将核苷酸片段进行拼接，获得拼接后的PCR产物；(8)用设计的首尾引物，对PCR产物进行第三轮PCR扩增，获得双链DNA片段。本发明的方法成本低，一次合成的通量高。 | ||
| 搜索关键词： | 半导体 芯片 通量 合成 核苷酸 组装 dna 方法 | ||
【主权项】：
一种半导体芯片高通量合成核苷酸池及组装双链DNA的方法，该方法以半导体芯片合成核苷酸池，用合成的核苷酸池组装成双链DNA，其特征在于，包括以下步骤：(1)将欲合成的双链DNA分成多个DNA片段；(2)用(1)中获得的DNA片段设计核苷酸；(3)以(2)中的核苷酸作为引物，在引物的两端分别加上序列，合成核苷酸序列，所述核苷酸序列通过半导体芯片制备；(4)用含有生物素标记的引物进行第一轮扩增，获得第一轮PCR产物；(5)用至少一种重组酶重组(4)中获得的第一轮PCR产物，得到PCR混合物；(6)纯化(5)中的PCR混合物；(7)用(6)中纯化后的PCR混合物进行第二轮PCR，将核苷酸片段进行拼接，获得拼接后的PCR产物；(8)用设计的首尾引物，对(7)中的PCR产物进行第三轮PCR扩增，获得双链DNA片段。
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