[发明专利]半导体芯片高通量合成核苷酸池及组装双链DNA的方法有效
申请号: | 201510744597.5 | 申请日: | 2015-11-05 |
公开(公告)号: | CN105238777A | 公开(公告)日: | 2016-01-13 |
发明(设计)人: | 齐金才;刁文一;柳伟强;孙德斌;杨平 | 申请(专利权)人: | 苏州泓迅生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 苏州慧通知识产权代理事务所(普通合伙) 32239 | 代理人: | 黄建月 |
地址: | 215123 江苏省苏州市工*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明涉及半导体芯片高通量合成核苷酸池及组装双链DNA的方法,该方法包括以下步骤:(1)将预合成的双链DNA分成多个DNA片段;(2)用DNA片段设计核苷酸;(3)在核苷酸两端加上flank序列和重组酶的酶切识别序列,合成核苷酸序列,核苷酸序列用半导体芯片制备;(4)将核苷酸从半导体芯片上洗脱出来;(5)用flank序列做引物进行PCR扩增,获得PCR产物,通过PCR扩增,合成的每条核苷酸的量都大大增加,用于后续步骤;(6)用重组酶酶切PCR产物,同时核苷酸拼接起来,边切边连,获得双链DNA片段。该方法成本低,一次合成的通量高,可以应用于代谢通路,生物途径,生物元件库或者基因组等的组装。 | ||
搜索关键词: | 半导体 芯片 通量 合成 核苷酸 组装 dna 方法 | ||
【主权项】:
半导体芯片高通量合成核苷酸池及组装双链DNA的方法,该方法以半导体芯片合成核苷酸池,再用核苷酸池组装双链DNA,其特征在于,该方法包括以下步骤:(1)将预合成的双链DNA分成多个DNA片段;(2)用(1)中所述的DNA片段设计核苷酸;(3)在(2)中所设计的核苷酸两端加上flank序列和重组酶的酶切识别序列,合成核苷酸序列,所述核苷酸序列用半导体芯片制备;(4)将核苷酸从半导体芯片上洗脱出来;(5)用flank序列做引物进行PCR扩增,获得PCR产物,通过PCR扩增,合成的每条核苷酸的量都大大增加,用于后续步骤;(6)用重组酶酶切步骤(5)中获得的PCR产物,同时核苷酸拼接起来,边切边连,获得双链DNA片段。
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