[发明专利]用于检测女性原发不孕的VIII型β-微管蛋白基因及试剂盒

摘要

本发明属于基因检测技术领域，具体为用于检测女性原发不孕的VIII型ß‑微管蛋白基因及试剂盒。本发明涉及的人类微管蛋白基因‑VIII型ß‑微管蛋白基因：TUBB8基因，它的突变时是导致因卵子不成熟致女性不孕的原因。通过检测TUBB8基因的突变可作为判断因卵子不成熟致女性不孕的标记基因。利用本发明提供的TUBB8基因可用于评价或制备因卵子不成熟致女性不孕的筛查试剂盒。利用本发明提供的TUBB8基因可用于指导临床相应患者进行试管婴儿术时的操作方法；利用本发明提供的TUBB8基因可用于评价或制备IVF/ICSI有效性的筛查试剂盒。

主权项

1.检测TUBB8基因是否发生突变的引物对用于制备检测女性原发不孕试剂盒的用途，其特征在于，所述引物对如下述：5’‑AGTTCCCAGAGGATGACCTTAGCA‑3’ （SEQ ID NO.2），5’‑GCTATTTAAACGTTGGCGGAGG‑3’ （SEQ ID NO.3），5’‑ACCAGGAGACCATCACACAG‑3’ （SEQ ID NO.4） ，5’‑CGCTCAATCTGCCTCTCCTA‑3’ （SEQ ID NO.5） ，5’‑AACGCAGCAGGAGATGTGAA‑3’ （SEQ ID NO.6） ，5’‑CCCTGCAAGAACCTGAGCTG‑3’ （SEQ ID NO.7） ，当用于女性原发不孕时：TUBB8有四个外显子，对其中第1‑3号外显子，利用引物对：5’‑AGTTCCCAGAGGATGACCTTAGCA‑3’ （SEQ ID NO.2），5’‑GCTATTTAAACGTTGGCGGAGG‑3’ （SEQ ID NO.3），进行PCR扩增，然后利用相同的引物进行测序，与UCSC中TUBB8的标准序列SEQ ID NO.1进行比对，从而发现突变；对其中第4号外显子，利用引物对：5’‑ACCAGGAGACCATCACACAG‑3’ （SEQ ID NO.4） ，5’‑CGCTCAATCTGCCTCTCCTA‑3’ （SEQ ID NO.5） ，进行PCR扩增；然后利用引物对：5’‑AACGCAGCAGGAGATGTGAA‑3’ （SEQ ID NO.6） ，5’‑CCCTGCAAGAACCTGAGCTG‑3’ （SEQ ID NO.7） ，进行测序，再与UCSC中TUBB8的标准序列SEQ ID NO.1进行比对，从而发现突变。