[发明专利]基于同位素质谱技术鉴别橄榄油产地的方法

摘要

本发明公开一种基于同位素质谱技术鉴别橄榄油产地的方法。该方法主要步骤如下：(1)样品前处理；(2)对步骤(1)所得上清液进行气相色谱‑质谱分析，确定样品中脂肪酸甲酯的种类；(3)根据步骤(2)确定的脂肪酸甲酯的种类，采用气相色谱‑稳定同位素质谱联用技术测定步骤(1)所得上清液中每种脂肪酸甲酯的δ13C值，并计算出每种脂肪酸的δ13C值；(4)采用元素分析‑稳定同位素质谱联用技术测定橄榄油全油的δ13C值；(5)根据步骤(1)‑(4)的方法，建立不同产地橄榄油的脂肪酸δ13C数据库以及橄榄油全油δ13C数据库，并进行数据统计分析，从而对不同产地的橄榄油进行分类。

主权项

1.一种基于同位素质谱技术鉴别西班牙橄榄油产地的方法，其特征在于，该方法包括如下步骤：（1）样品前处理：取橄榄油试样至于具塞比色管中，加入0.5mol/L的NaOH‑甲醇溶液，涡旋，超声20‑30min，然后往比色管加入正己烷，振荡，静置，取上清液备用；所述试样与NaOH‑甲醇溶液的质量体积比为80‑100mg：10ml，所述正己烷与NaOH‑甲醇溶液体积比为1:2；（2）对步骤（1）所得上清液进行气相色谱‑质谱分析，确定样品中脂肪酸甲酯的种类；气相色谱‑质谱测定条件为：色谱柱：RTX‑WAX；进样1μL；载气为高纯氦气，流速为1.5 mL/min，分流比20:1，进样口：260℃；升温程序如下：起始温度为50℃，持续3min；然后以15℃/min速率上升至150℃，在150℃保持4min，最后以4.5℃/min速率上升至230℃，在230℃保持15 min，离子源温度：230℃，接口温度：250℃，检测方式：全扫描方式，根据质谱检测结果确定所测样品中脂肪酸甲酯的种类；（3）根据步骤（2）确定的脂肪酸甲酯的种类，采用气相色谱‑稳定同位素质谱联用技术测定步骤（1）所得上清液中每种脂肪酸甲酯的δ13C值，并用如下公式计算出每种脂肪酸的δ13C值：δ13CFA=[(n+1) δ13CFAME‑ δ13CMethyl group]/n      (I)在式（I）中，FA为脂肪酸；FAME为脂肪酸甲酯；Methyl group为甲基；n为甲酯化之前的碳原子数目；气相色谱‑稳定同位素质谱测定条件为：色谱柱为RTX‑WAX；进样1μL，载气为高纯氦气，流速为 1.5 mL/min，分流比为20:1，进样口：260℃；柱箱采用升温程序，起始温度为50℃，持续3min，然后以15℃/min速率上升至150℃，在150℃保持4min，最后以4.5℃/min速率上升至230℃，在230℃保持15 min，燃烧管温度为1000℃；（4）采用元素分析‑稳定同位素质谱联用技术测定橄榄油全油的δ13C值；元素分析‑稳定同位素质谱测定条件为：载气为高纯氦气，流速为 80‑120 mL/min，参考气为CO2，流速为150‑180 mL/min，助燃气为氧气，流速为240‑250 mL/min，燃烧管温度为1000℃，柱箱温度为60℃，进样方式为固体进样；（5）根据步骤（1）‑（4）的方法，建立不同产地橄榄油的脂肪酸δ13C数据库以及橄榄油全油δ13C数据库，利用SPSS17.0分析软件，对不同产地橄榄油的脂肪酸δ13C和橄榄油全油δ13C进行因子分析，以橄榄油总碳，油酸和亚麻油酸的13C/12C比值为主要因子，利用上述三种物质的13C/12C比值，进行判别分析，从而对西班牙不同产区的橄榄油进行分类。