[发明专利]一种RGD多肽靶向的锌掺杂的四氧化三铁纳米颗粒的制备方法

摘要

本发明涉及一种RGD多肽靶向的锌掺杂的四氧化三铁纳米颗粒的制备方法，包括DMSA-Zn_0.4Fe_2.6O₄ NPs的制备和c(RGDyK)-DMSA- Zn_0.4Fe_2.6O₄ NPs的制备，该方法通过准确控制锌的掺杂量来提高Fe₃O₄ NPs的磁饱和值，并在其表面修饰肿瘤靶向肽RGD，最终得到了一种肿瘤靶向性的纳米复合磁性材料。该纳米颗粒具有肿瘤靶向性、高磁饱和值、粒径小、性能稳定、生物相容性好的特点。所得的产物能满足磁共振成像、磁热疗及药物载体系统等临床应用的需求。

主权项

一种RGD多肽靶向的锌掺杂的四氧化三铁纳米颗粒的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）DMSA‑Zn_0.4Fe_2.6O₄ NPs的制备：首先把FeSO₄·(NH₄)₂SO₄·6H₂O 和ZnSO₄溶解在20ml的水里，使得前体达到1.73×10^‑3 mol Fe²⁺ and 2.67×10^‑4 mol Zn²⁺ 的目的；其次，把10ml油酸、10ml水和1g NaOH混合，在常温下磁力搅拌直到得到均匀的溶液；再者，把前体Fe²⁺和Zn²⁺倒进该均匀溶液中，搅拌几分钟以后，混合溶液变成深棕色；最后把该溶液转移进50ml反应釜中，密封，230度加热15个小时；反应结束以后，冷却至室温，产品沉积在釜底，用环己烷溶解取出纳米颗粒；再把乙醇加入容有纳米颗粒的环己烷中，沉淀出纳米颗粒，最后纳米颗粒再用乙醇反复洗数次；颗粒表面的有机表面活性剂用二巯基丁二酸（DMSA）在60℃水浴机械搅拌12小时，重复两次交换，得到DMSA包裹的锌掺杂的超顺磁四氧化三铁纳米颗粒，该纳米颗粒能够彻底溶解在水相中；（2）c(RGDyK)‑DMSA‑ Zn_0.4Fe_2.6O₄ NPs的制备：取EDC和NHS溶解在PBS缓冲液中（PH=7.4， 0.05M）中，并用0.2M的盐酸调解PH；把上述溶解加入到一定量的DMSA‑Zn_0.4Fe_2.6O₄ NPs中，并超声10分钟，室温下反应；将混合物用PBS 缓冲液（PH=7.4， 0.01M）磁分离洗涤3 次以除去多余的EDC和NHS，将活化后的DMSA‑Zn_0.4Fe_2.6O₄ NPs重新分散在PBS缓冲液中；把c(RGDyK)溶解在PBS缓冲液中，并加入到以上活化后的DMSA‑Zn_0.4Fe_2.6O₄ NPs溶液中，室温反应；混合物用PBS 缓冲液（PH=7.4， 0.01M）磁分离洗涤3 次以除去多余的游离抗体，最后重悬于PBS(0.01M，pH 7.4) 中，4℃保存。