[发明专利]角膜缘干细胞的分离方法在审
| 申请号： | 201510791044.5 | 申请日： | 2015-11-16 |
| 公开（公告）号： | CN105219704A | 公开（公告）日： | 2016-01-06 |
| 发明（设计）人： | 陈海佳;王一飞;葛啸虎;吴子杰;张维敏 | 申请（专利权）人： | 广州赛莱拉干细胞科技股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/074 | 分类号： | C12N5/074 |
| 代理公司： | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人： | 赵青朵 |
| 地址： | 510000 广东省广州市国*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明涉及干细胞培养领域，尤其涉及一种角膜缘干细胞的分离方法。本发明将中性蛋白酶和IV胶原酶组合，使角膜缘组织在复合酶的共同作用下酶解，从而保证短时间内酶解获得细胞、减少对细胞的损伤，增大细胞得率，提高了所得细胞的纯度。该方法操作简便，不需要高端的仪器设备，对细胞的损伤也较小。实验表明，采用本发明提供的培养基分离角膜缘干细胞，每1cm3角膜缘组织能够获得8.4×105个～9.0×105个角膜缘干细胞，细胞中抗体CX43的阳性率为0，AE5的阳性率为0.1％，BrdU的阳性率为70.1％，PCNA的阳性率为82.1％。该效果显著优于现有技术。 | ||
| 搜索关键词： | 角膜 干细胞 分离 方法 | ||
【主权项】：
一种角膜缘干细胞的分离方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1：将胎儿角膜缘组织以复合酶酶解；步骤2：将所述酶解后的产物以角膜缘干细胞分离培养基培养后，传代；所述复合酶包括中性蛋白酶和IV胶原酶；所述角膜缘干细胞分离培养基包括AcSDKP、胎牛血清和基础培养液。
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