[发明专利]一种降解焦油废水中氨氮生物制剂的制备方法

摘要

本发明公开了一种降解焦油废水中氨氮生物制剂的制备方法，属于生物制剂领域。本发明用大豆根瘤颗粒分别和硝化菌和反硝化菌污泥混合对硝化菌培养，将培养出的硝化菌分离、提取制得生物制剂，再将含有反硝化菌的污泥培养在营养基质，将培养得到的反硝化菌菌株分离制得反硝化菌生物制剂，本发明通过硝化菌污泥和反硝化菌污泥分别进行培养菌株，再制成不同的生物制剂，硝化菌生物制剂在好养的条件可以提高对氨氮的氧化能力，反硝化菌生物制剂在厌氧的条件下可以提高对氨氮还原能力，对原本不能降解的氨氮也能有很好的降解作用，而且处理方法绿色环保，不会产生二次污染。

主权项

一种降解焦油废水中氨氮生物制剂的制备方法，其特征在于具体步骤为；（1）取200～300g大豆根瘤放入80～90℃烘箱中干燥1～2h，干燥后放入粉碎机中粉碎，过筛筛选出50～60目颗粒，取100～150g大豆根瘤颗粒和300～400g含硝化菌的污泥搅拌混合，再取100～150g大豆根瘤颗粒和350～450g反硝化菌的污泥进行搅拌混合；（2）分别取10～20g可溶性淀粉、50～60g葡萄糖、50～70g琼脂、50～60g酸水解干酪素进行混合，向混合物中加入2～3L的水，并搅拌直至混合物完全溶解，得到培养液，将培养液放入高温灭菌锅中在160～180℃下灭菌10～20min，灭菌后加入上述含硝化菌污泥的混合物，用质量分数30～40%的草酸调节pH值为5～6，再放在气浴恒温摇床上进行好养培养，培养温度为28～30℃，培养10～12h，对硝化菌培养；（3）取上述培养后基质，向其中加入总质量30%的丙酮溶液，进行离心分离10～15min，得沉淀物，向沉淀物中按固液质量比1:1加入质量分数0.9%生理盐水，再进行离心分离，取上清液在旋转蒸发浓缩至原来体积的10%，即可得硝化菌生物制剂；（4）取10～20g酵母浸膏、30～40g蛋白胨，20～25g葡萄糖，40～50g可溶性淀粉，向其中加入150～200mL的水，搅拌使其粘稠，制得培养基质，将培养基质放入高温灭菌锅中在120～140℃下灭菌10～20min，灭菌后与步骤（1）富含反硝化菌的污泥混合物混合，将其密封，并向其中通入氮气，直至完全除去氧气，在厌氧的条件下进行培养，培养温度为30～35℃，培养8～10h后得到反硝化菌菌株；（5）将10～15g上述培养后菌株的基质，加入90～100mL质量分数0.9%无菌生理盐水，在85℃水浴中搅拌10～15min，进行稀释得悬浊液，将悬浊液均匀涂布在牛肉膏蛋白胨平板上，在25～28℃下培养20～24h，出现圆形淡黄色单菌落，挑取菌株加入到甘油中进行储存，得反硝化菌生物制剂。