[发明专利]基于磁性微球的蛋白质N末端肽段分离方法有效
| 申请号： | 201510795300.8 | 申请日： | 2015-11-18 |
| 公开（公告）号： | CN105319116B | 公开（公告）日： | 2018-11-13 |
| 发明（设计）人： | 张祥民;李兰婷 | 申请（专利权）人： | 复旦大学 |
| 主分类号： | G01N1/34 | 分类号： | G01N1/34;G01N27/62 |
| 代理公司： | 上海正旦专利代理有限公司 31200 | 代理人： | 陆飞;盛志范 |
| 地址： | 200433 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种基于磁性微球的蛋白质N末端分离方法。本发明方法的步骤包括：合成磁性纳米粒子；对蛋白进行氨基封闭，再加入胰蛋的酶，得到氨基封闭蛋白的酶解液；用特劳特试剂和氨基封闭蛋白的酶解液进行反应，非N末端肽段得到巯基衍生；加入磁性纳米粒子对含巯基的非N末端肽段进行分离富集；最后用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱进行分析鉴定。本发明方法可以方便高效地去除非N末端肽段，提高蛋白质N末端肽段鉴定效果。 | ||
| 搜索关键词： | 基于 磁性 蛋白质 端肽 分离 方法 | ||
【主权项】：
1.一种基于磁性微球的蛋白质N末端肽段分离方法，其特征在于，具体步骤为：（1）首先，合成磁性纳米粒子：Fe3O4；（2）对蛋白进行氨基封闭，再加入胰蛋白酶，加入量为蛋白重量的2.5%‑5%，得到氨基封闭蛋白的酶解液；（3）然后，用特劳特试剂和氨基封闭蛋白的酶解液进行反应，非N末端肽段得到巯基衍生；（4）加入磁性纳米粒子Fe3O4对含巯基的非N末端肽段进行分离富集；（5）最后用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱进行分析鉴定。
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