[发明专利]一步快速检测甜瓜多种病毒的试剂盒及其快速检测方法

摘要

一步快速检测甜瓜多种病毒的试剂盒及其快速检测方法，它涉及一种快速检测甜瓜病毒病的试剂盒及其快速检测方法。它解决了现有甜瓜病毒病多重RT‑PCR检测技术可同时检测的甜瓜病毒病种类少的问题。一步快速检测甜瓜多种病毒的试剂盒中含有7对RT‑PCR引物。快速检测方法：一、提取被感染病毒叶片的总RNA；二、反转录成cDNA；三、用试剂盒中的7对RT‑PCR引物进行多重RT‑PCR。本发明通过一次PCR可以同时检测出多达7种的甜瓜病毒病，可在田间采集、鉴定甜瓜病毒病种类，具有鉴定过程简单、步骤少、设备要求低、费用少、时间短和精确性高等优点。

主权项

1.一步快速检测甜瓜多种病毒的试剂盒，其特征在于一步快速检测甜瓜多种病毒的试剂盒中含有7对RT‑PCR引物；用于扩增西瓜花叶病毒病的引物对：上游引物WMV1F的核苷酸序列为5’‑GAGGAACTGTGGTTCATGTC‑3’，下游引物WMV1R的核苷酸序列为5’‑GCAGTGTGCCTCTCAGTATT‑3’；用于扩增黄瓜花叶病毒病的引物对：上游引物CMV1F的核苷酸序列为5’‑GACAGTTGGGAATCGGA‑3’，下游引物CMV1R的核苷酸序列为5’‑AACAGGGAGCAAGAGGA‑3’；用于扩增小西葫芦黄花叶病毒病的引物对：上游引物ZYMV‑F的核苷酸序列为5’‑CACGAAGGACAAGGATGTGA‑3’，下游引物ZYMV‑R的核苷酸序列为5’‑ACATTGCTAAGAGCTGCTGC‑3’；用于扩增南瓜花叶病毒的引物对：上游引物SqMV‑1‑F的核苷酸序列为5’‑GGATGCCTTTGGCTATTGG‑3’，下游引物SqMV‑1‑R的核苷酸序列为5’‑GCCTCCTCGTGGCTTTGTA‑3’；用于扩增烟草花叶病毒病的引物对：上游引物TMV‑F的核苷酸序列为5’‑TTTTGGAGGAATGAGTTT‑3’，下游引物TMV‑R的核苷酸序列为5’‑AGGGAAAAACACTATGC‑3’；用于扩增番木瓜环斑病毒的引物对：上游引物PRSV‑F的核苷酸序列为5’‑CTCGTGCCACTCAATCTCAA‑3’，下游引物PRSV‑R的核苷酸序列为5’‑TTCCACTGTGTGTCTCTCCG‑3’；用于扩增甜瓜黄斑病毒的引物对：上游引物MYSV F的核苷酸序列为5’‑TTGAGGCAGGATCTGAAGTC‑3’，下游引物MYSV R的核苷酸序列为5’‑GGCCAATCTGATCCAGAGTA‑3’。