[发明专利]一种鉴别汉麻、苎麻、亚麻原麻纤维种类的PCR引物组以及PCR鉴别方法有效
申请号: | 201510814830.2 | 申请日: | 2015-11-22 |
公开(公告)号: | CN105274103B | 公开(公告)日: | 2018-05-25 |
发明(设计)人: | 保琦蓓;傅科杰;任清庆;冯云;尤建武;杨力生 | 申请(专利权)人: | 保琦蓓 |
主分类号: | C12N15/11 | 分类号: | C12N15/11;C12Q1/6895 |
代理公司: | 上海晨皓知识产权代理事务所(普通合伙) 31260 | 代理人: | 成丽杰 |
地址: | 315048 浙江省宁*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明涉及生物信息技术领域,公开了一种鉴别汉麻、苎麻、亚麻原麻纤维种类的PCR引物组以及PCR鉴别方法。该引物组由SEQ ID NO:1‑6所示核苷酸序列组成,其中SEQ ID NO:1‑2所示核苷酸序列为鉴别汉麻的上、下游引物,SEQ ID NO:3‑4所示核苷酸序列为鉴别苎麻的上、下游引物,SEQ ID NO:5‑6所示核苷酸序列为鉴别亚麻的上、下游引物。本发明依靠生物技术提供了一套专属性较强的引物,可用来专属鉴别汉麻、苎麻和亚麻,而彼此间互不干扰鉴别,同时所述方法借助PCR技术,具有需要样本量小、检测方便、稳定,可操作性强、结果可靠等优点,可以广泛应用于纺织用麻类原麻纤维检测成分分析中。 | ||
搜索关键词: | 鉴别 亚麻 苎麻 汉麻 核苷酸序 下游引物 原麻 纤维 生物信息技术 核苷酸序列 成分分析 互不干扰 纤维检测 样本量 引物组 专属性 可用 麻类 引物 生物技术 检测 应用 | ||
【主权项】:
1.一种汉麻、苎麻、亚麻原麻纤维种类的PCR鉴别方法,其特征在于,包括:步骤1、提取待测的麻类植物纤维样本的DNA;步骤2、采用SEQ ID NO:1-2所示核苷酸序列或SEQ ID NO:3-4所示核苷酸序列或SEQID NO:5-6所示核苷酸序列对样本DNA进行PCR扩增;步骤3、PCR扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳,若采用SEQ ID NO:1-2所示核苷酸序列扩增的产物为170bp片段的样本即为汉麻纤维,若采用SEQ ID NO:3-4所示核苷酸序列扩增的产物为221bp片段的植物纤维为苎麻纤维,若采用SEQ ID NO:5-6所示核苷酸序列扩增的产物为270bp片段的植物纤维为亚麻纤维;其中,步骤2所述PCR扩增体系为:反应总体积为25μl,其中样本DNA 20ng,2×Premix Taq缓冲液12.5μl,5μM上、下游引物各1μl,余量为ddH2 O;步骤2所述PCR扩增的程序为:95℃预变性5min;95℃变性30s、55℃退火30s、72℃延伸45s,循环27次;72℃延伸10min,10℃保存。
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